鬼笔环肽偶联物

鬼笔环肽-iFluor 555标记

仅用于固定细胞。固定和透化细胞、细胞培养、无细胞实验、甲醛固定和透化组织切片

简要概述

鬼笔环肽-iFluor 555标记（与Alexa Fluor® 555标记鬼笔环肽相当）能特异性结合F-肌动蛋白。该衍生物在纳摩尔浓度下即可作为高效探针，用于标记、鉴定和定量分析经甲醛固定透化处理的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的F-肌动蛋白。鬼笔环肽与肌动蛋白丝的结合亲和力显著高于肌动蛋白单体，其作用机制主要体现在：1）显著降低肌动蛋白亚基从纤丝末端解离的速率常数；2）通过抑制纤丝解聚过程来稳定肌动蛋白丝结构；3）抑制F-肌动蛋白的ATP水解活性。

鬼笔环肽在细胞内的生物学效应具有明显的浓度依赖性特征。当以低浓度导入细胞质时，它能选择性募集胞质中低聚合状态的肌动蛋白及细丝蛋白，形成稳定的肌动蛋白聚合物"岛"，但不会影响应力纤维（即微丝粗束）的结构完整性。这一独特性质使其成为研究细胞内F-肌动蛋白空间分布的理想工具——通过荧光标记的鬼笔环肽类似物对肌动蛋白丝进行特异性染色，可实现光学显微镜下的精细观察。

荧光鬼笔环肽衍生物在生物医学研究领域展现出重要价值：1）可用于活细胞/固定细胞中肌动蛋白丝的精准定位；2）实现体外单根肌动蛋白丝的高清可视化；3）适用于高分辨率肌动蛋白网络研究，这类衍生物已广泛应用于细胞骨架研究。为满足多元化的实验需求，AAT Bioquest公司提供涵盖不同荧光标记的鬼笔环肽衍生物系列产品，为多色荧光成像研究提供全面解决方案。

注意事项

产品外观形态：液体（浓度1mg/ml）（注：鬼笔环肽系列产品有固体和液体两种，液体为DMSO溶解后的产品，则不需再溶解。）

百萤生物公司简介
                                                       百萤生物是美国AAT Bioquest品牌代理
西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的高新技术企业；主要以荧光探针，分子探针，核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心，产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪，抗体标记、新药筛选等领域
美国AAT Bioquest公司长年以来与百萤生物互补优势，为国内外广大用户提供光谱检测，底物显色，荧光发光技术等全系列解决方案。近年来，百萤生物已与多家药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系；我们的服务宗旨：为广大科研用户提供更好的服务.
1.更高品质保障的AAT Bioquest产品（AAT Bioquest作为专业的光谱学检测产品生产商，能提供 高性价比的产品）。
2.更低的价格和高性价比的选择，每周都有发货补充，货期短到您意想不到，满足客户的需求就是我们的宗旨，只要您下单，我们就能保证您在短期内收到所需产品。我们将一如既往的为客户和代理商提供售后保障。作为代理，百萤生物给您优惠的折扣和专业的技术支持。

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其它非科研用途！

产品说明书

样品分析方案

概述

在微孔板孔中制备样品

从样品中取出液体

添加鬼笔环肽-iFluor 555标记溶液（100μL/孔）

在室温下染色细胞20至90分钟

清洗细胞在显微镜下观察样品

注意：将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。

 

操作步骤

1.制备1000 X鬼笔环肽DMSO储备液：将30μLDMSO加入小瓶中。

2.制备1X鬼笔环肽结合物工作溶液：加入1μL1000X鬼笔环肽结合物DMSO溶液至1mL含1％BSA的PBS中。

注意1：鬼笔环肽结合物未使用的1000X DMSO储备溶液应等分并储存在-20℃，避光。

注意2：不同的细胞类型可能染色不同。鬼笔环肽结合物工作溶液的浓度的制备需要根据实际而定。

3.染色细胞：

3.1执行甲醛固定，在室温下将含3.0-4.0％甲醛的细胞在PBS中孵育10-30分钟。

注意：避免使用任何含甲醇的固定剂，因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

3.2用PBS冲洗固定细胞2-3次。

3.3可选：在PBS中加入0.1％Triton X-100固定细胞（步骤2.2）3至5分钟，以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。

3.4将100μL/孔（96孔板）鬼笔环肽缀合物工作溶液（来自步骤1）加入固定的细胞（来自步骤2.2或2.3）中，并在室温下染色细胞20至90分钟。

3.5在加上盖玻片之前，用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以除去过量的鬼笔环肽结合物，然后在显微镜下进行，密封和成像。