人（Human）热休克蛋白-70（HSP-70）ELISA

人（Human）热休克蛋白-70（HSP-70）ELISA 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆

试验原理：

HSP-70试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知HSP-70浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HSP-70和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HSP-70的浓度呈比例关系。

人（Human）热休克蛋白-70（HSP-70）ELISA 检测试剂盒试剂盒内容及其配制

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人（Human）热休克蛋白-70（HSP-70）ELISA 检测试剂盒操作注意事项

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人（Human）热休克蛋白-70（HSP-70）ELISA 检测试剂盒试剂的准备

1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案

局限

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的HSP-70标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的HSP-70含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-80ng/ml

4、敏感度： 0.1 ng/ml
XY-EL-H1841c 人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒说明书 Human PGF2α (Prostaglandin F2α) ELISA Kit
XY-EL-H1842c 人前列腺素F受体(FP)ELISA试剂盒说明书 Human FP (Prostaglandin F Receptor) ELISA Kit
XY-EL-H1843c 人前列腺素I合酶(PTGIS)ELISA试剂盒说明书 Human PTGIS (Prostaglandin I Synthase) ELISA Kit
XY-EL-H1844c 人前列腺素E合酶2(PTGES2)ELISA试剂盒说明书 Human PTGES2 (Prostaglandin E Synthase 2) ELISA Kit
XY-EL-H1845c 人前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)ELISA试剂盒说明书 Human PTGS1 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 1) ELISA Kit
XY-EL-H1846c 人前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2/COX-2)ELISA试剂盒说明书 Human PTGS2/COX-2 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2) ELISA Kit
XY-EL-H1847c 人前列腺酸性磷酸酶(ACP3/PAP)ELISA试剂盒说明书 Human ACP3/PAP (Prostatic Acid Phosphatase 3) ELISA Kit
XY-EL-H1848c 人氨基端前心钠肽(NT-ProANP)ELISA试剂盒说明书 Human NT-ProANP (N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit
XY-EL-H1849c 人强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒说明书 Human Dyn (Big Dynorphin) ELISA Kit
XY-EL-H1850c 人桥粒斑蛋白(DSP)ELISA试剂盒说明书 Human DSP (Desmoplakin) ELISA Kit
XY-EL-H1851c 人桥粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)ELISA试剂盒说明书 Human DSG-E1 (Desmogleins 1) ELISA Kit
XY-EL-H1852c 人鞘磷脂(SM/SPH)ELISA试剂盒说明书 Human SM/SPH (Sphingomyelin) ELISA Kit
XY-EL-H1853c 人剪切修复交叉互补基因1(ERCC1)ELISA试剂盒说明书 Human ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Rodent Repair Deficiency Complementation 1) ELISA Kit
XY-EL-H1854c 人血幼素(HJV/HFE2)ELISA试剂盒说明书 Human HJV/HFE2 (Hemojuvelin/Hemochromatosis Type 2) ELISA Kit
XY-EL-H1855c 人激肽释放酶1(KLK1)ELISA试剂盒说明书 Human KLK1 (Kallikrein 1) ELISA Kit
XY-EL-H1856c 人肝X受体α(LXRα)ELISA试剂盒说明书 Human LXRα (Liver X Receptor Alpha) ELISA Kit
XY-EL-H1857c 人去氨精氨酸加压素(dDAVP)ELISA试剂盒说明书 Human dDAVP (1-Desamino-8D-Arginine Vasopressin) ELISA Kit
XY-EL-H1859c 人热休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)ELISA试剂盒说明书 Human HSPβ6/HSP-20 (Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit
XY-EL-H1860c 人热休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)ELISA试剂盒说明书 Human HSP-27/HSPB1 (Heat Shock Protein 27) ELISA Kit
XY-EL-H1861c 人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒说明书 Human HSP-40 (Heat Shock Protein 40) ELISA Kit
XY-EL-H1862c 人热休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)ELISA试剂盒说明书 Human HSP-60/HSPD1 (Heat Shock Protein 60) ELISA Kit
XY-EL-H1863c 人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒说明书 Human HSP-70 (Heat Shock Protein 70) ELISA Kit
XY-EL-H1864c 人热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒说明书 Human HSP-90 (Heat Shock Protein 90) ELISA Kit
XY-EL-H1865c 人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒说明书 Human HSP gp96 (Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit
XY-EL-H1866c 人热休克转录因子2(HSF2)ELISA试剂盒说明书 Human HSF2 (Heat Shock Transcription Factor 2) ELISA Kit
XY-EL-H1867c 人热休克转录因子1(HSF1)ELISA试剂盒说明书 Human HSF1 (Heat Shock Transcription Factor 1) ELISA Kit
XY-EL-H1868c 人妊娠特异性β1糖蛋白(PSG1/SP1)ELISA试剂盒说明书 Human PSG1/SP1 (Pregnancy Specific Beta-1-Glycoprotein 1) ELISA Kit