人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA 检测试剂盒

人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用

试验原理：

DBH试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知DBH浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将DBH和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中DBH的活性浓度呈比例关系。

人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA 检测试剂盒试剂盒内容及其配制

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA 检测试剂盒操作注意事项

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA 检测试剂盒试剂的准备

1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

性能

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

4.局限性：6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

结果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的DBH标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的DBH含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-400ng/ml

4、敏感度： 1.0ng/ml
XY-EL-H1273c 人SPARC样蛋白1(SPARCL1)ELISA试剂盒说明书 Human SPARCL1 (SPARC Like Protein 1) ELISA Kit
XY-EL-H1274c 人信号素3A(SEMA3A)ELISA试剂盒说明书 Human SEMA3A (Semaphorin 3A) ELISA Kit
XY-EL-H1275c 人分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒说明书 Human sIgA (Secretory Immunoglobulin A) ELISA Kit
XY-EL-H1276c 人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA试剂盒说明书 Human SLPI (Secretory Leukocyte Protease Inhibitor) ELISA Kit
XY-EL-H1277c 人低氧诱导因子1α (HIF-1α)ELISA试剂盒说明书 Human HIF-1α (Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit
XY-EL-H1278c 人血清淀粉样蛋白A3(SAA3)ELISA试剂盒说明书 Human SAA3 (Serum Amyloid A3) ELISA Kit
XY-EL-H1279c 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒说明书 Human SAP (Serum Amyloid P Component) ELISA Kit
XY-EL-H1280c 人蛋白酶激活受体4(PAR4)ELISA试剂盒说明书 Human PAR4 (Protease Activated Receptor 4) ELISA Kit
XY-EL-H1281c 人脯氨酰羧肽酶(PRCP)ELISA试剂盒说明书 Human PRCP (Prolylcarboxypeptidase) ELISA Kit
XY-EL-H1282c 人复制蛋白A(RPA-70)ELISA试剂盒说明书 Human RPA-70 (replication protein A) ELISA Kit
XY-EL-H1283c 人G蛋白偶联受体120(GPR120)ELISA试剂盒说明书 Human GPR120 (G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit
XY-EL-H1284c 人胰腺再生蛋白3α(REG3α)ELISA试剂盒说明书 Human REG3α (Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha) ELISA Kit
XY-EL-H1285c 人富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)ELISA试剂盒说明书 Human Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit
XY-EL-H1286c 人富含半胱氨酸型酸性蛋白(SPARC)ELISA试剂盒说明书 Human SPARC (Secreted Protein Acidic And Rich In Cysteine) ELISA Kit
XY-EL-H1287c 人亮氨酸丰富α2糖蛋白1(LRG1)ELISA试剂盒说明书 Human LRG1 (Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1) ELISA Kit
XY-EL-H1288c 人胰腺再生蛋白3γ(REG3γ)ELISA试剂盒说明书 Human REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit
XY-EL-H1289c 人S100钙结合蛋白A8(S100A8)ELISA试剂盒说明书 Human S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit
XY-EL-H1290c 人S100钙结合蛋白A9(S100A9)ELISA试剂盒说明书 Human S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) ELISA Kit
XY-EL-H1291c 人G蛋白偶联受体37(GPR37)ELISA试剂盒说明书 Human GPR37 (G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit
XY-EL-H1292c 人S100钙结合蛋白A11(S100A11)ELISA试剂盒说明书 Human S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit
XY-EL-H1293c 人S100钙结合蛋白A12(S100A12 )ELISA试剂盒说明书 Human S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit
XY-EL-H1294c 人S100钙结合蛋白A13(S100A13 )ELISA试剂盒说明书 Human S100A13 (S100 Calcium Binding Protein A13) ELISA Kit
XY-EL-H1295c 人S100钙结合蛋白A6(S100A6)ELISA试剂盒说明书 Human S100A6 (S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit
XY-EL-H1296c 人S100钙结合蛋白A7 (S100A7)ELISA试剂盒说明书 Human S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit
XY-EL-H1297c 人S100钙结合蛋白B (S100B)ELISA试剂盒说明书 Human S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit
XY-EL-H1298c 人多配体聚糖1(SDC1)ELISA试剂盒说明书 Human SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit
XY-EL-H1299c 人干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒说明书 Human SCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit
XY-EL-H1300c 人干细胞因子受体(SCFR/c-Kit)ELISA试剂盒说明书 Human SCFR/c-Kit (Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit
XY-EL-H1301c 人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒说明书 Human GAL (Galanin) ELISA Kit
XY-EL-H1302c 人甘丙肽/甘丙素受体1(GALR1)ELISA试剂盒说明书 Human GALR1 (Galanin Receptor 1) ELISA Kit
XY-EL-H1303c 人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASP)ELISA试剂盒说明书 Human MASP (Mannan Binding Lectin Associated Serine Protease) ELISA Kit