- ￥5028
- KAPA
- 7962517001
- 2025年10月24日
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KAPA Frag Kit (96rxn)
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OXOID，BD培养基货期八周左右，部分现货。
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文献和实验一、 DNA 酶切反应 1、将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号，用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl，再加入重蒸水使总体积为19μl，将管内溶液混匀后加入1μl酶液，用手指轻弹管壁使溶液混匀，也可用微量离心机甩一下，使溶液集中在管底。此步操作是整个实验成败的关键，要防止错加，漏加。使用限制性内切酶时应尽量减少其离开冰箱的时间，以免活性降低。2、混匀反应体系后，将eppendorf管置于适当的支持物上（如插在泡沫塑料板上），37
进行，尽量避免星号活力。 一、 材料、试剂和仪器 1 材料：质粒DNA 2 试剂：限制性内切酶、ddH2O 3 仪器：微量移液枪，离心机，水浴锅， 电泳仪，紫外透射观测仪 注：酶切的选择原则一般是尽量扩大酶切体系，这样抑制因素得以稀释；基因组DNA或质粒DNA酶的用量较一般DNA大，一般为1μg/10U;所加酶的体积不能超过酶切总体积的1/10，否则甘油浓度会超过5%，会产生星号活力；对难切的质粒或基因组DNA应延长反应时间4—5hr, 甚至过夜。灭火限制
物理图谱 的特异性标记; (2)酶切产生的特异性片段可用于分子 克隆; DNA分子经限制性内切酶消化以后，产生不同大小的DNA片段，我们需要从中分离出所需的目的片段，进一步做亚克隆或用作探针。通过琼脂糖凝胶电泳可以将目的片段与其它DNA片段分开，然后从琼脂糖凝胶中回收含有相应片段的液体，经酚/氯仿处理、乙醇沉淀就可以获得符合要求的DNA片段。 2、酶切反应体系： 按下表配制酶解混合液，混匀，37℃ 保温2-4小时，加入上样缓冲液终止反应，或-20
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