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- 2025年08月23日
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guduo
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上海古朵生物有限公司
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9031-11-2
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250U
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产品名称：β-半乳糖苷酶（来源于大肠杆菌）9031-11-2
英文名称：β-Galactosidasefromescherichiacoli
CAS号：9031-11-2
产品货号：GD-AF1627
含量：99%
规格：250U
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文献和实验用传统的限制酶切和连接的方法产生入门克隆。这些载体配合合适的目的载体，可以用于表达天然蛋白或带有N端或C端融合标签的重组蛋白。为了在真核细胞中有效地翻译蛋白，所有的5个Gateway入门载体提供了Kozak 序列。此外，pENTR11提供了SD （Shine-Dalgarno）序列，便于在大肠杆菌中有效的翻译。2、PCR重组克隆 重组是从PCR产物创建Gateway入门克隆的另一种方法。这种方法是通过合并attB位点到上游和下游引物上，然后共同孵育PCR扩增产物和pDONR载体（包含attP位点
体外连接的重组DNA分子导入合适的受体细胞才能进行大量复制，增殖和表达，其首要目的是获得大量的克隆基因。虽然PCR技术，体外转录及翻译系统能部分达到大量扩增的目的，但毕竟受到体外操作的许多限制。重组质粒导入宿主细胞最常用的方法之一就是转化（transformation）。转化这一概念来源于遗传学：细菌细胞的生物学由于吸收外源DNA发生可遗传的改变叫转化。很多细菌如杆菌，链霉菌属能自然发生转化，其它菌属包括大肠杆菌自然状态下无法发生转化，但可以通过人工诱导使其处在易于接受外源DNA分子的状态
；可增强大肠杆菌中的表达水平。硫氧还蛋白尽管其尺寸很小（11kDa），但硫氧还蛋白作为促溶标签非常有效（与所有增溶标签一样，溶解度不一定意味着功能性折叠，并且融合蛋白可能在其标签被切割时发生沉淀）。硫氧还蛋白有个独特的性质，就是耐高温，在高达 80°C 的温度下稳定，并且可以赋予其融合伴侣一定的热稳定性。这样，细胞蛋白可以经热变性处理而不影响融合蛋白。纯化可以使用苯基胂氧化物树脂或抗体共轭树脂来实现。V5来源于副粘病毒 SV5 的 P / V 蛋白的 95 - 108 位氨
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