- ￥3300
- Novus
- 15.6-1000
- VAL193
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 技术资料
- 样本：
Cell culture supernatant, serum
- 适应物种：
Hu
- 应用：
VAL193
- 检测方法：
定量检测天然和重组人 Eotaxin-2 的浓度
- 检测范围：
15.6-1000
- 规格：
96t
Human CCL24/Eotaxin-2/MPIF-2 ELISA Kit
产品信息及操作手册
人 CCL24/Eotaxin-2/MPIF-2 ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL193
适用于定量检测天然和重组人 Eotaxin-2 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断
有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效
18
I. 背景
Eotaxin-2是一种CC趋化因子，也被称为CCL24、MPIF-2或Ckβ-6，最初是通过对活
化单核细胞文库的大规模cDNA测序发现的(1)，1997年有三个独立的研究小组报道了这一
特征(1-3)。Eotaxin-2在体外(1-4)和体内(5)选择性地招募和激活嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒
细胞，并通过CC趋化因子受体3 (CCR3)发出信号。和Eotaxin一样，Eotaxin-2是嗜酸性
粒细胞增加的潜在因素，如过敏反应和寄生虫感染(关于Eotaxin的综述，见文献6)。
成熟的Eotaxin-2是一种糖基化的93个氨基酸(aa)残基蛋白，是在去除26个aa的信号
肽后产生的。预测分子量为10.6 kDa。Eotaxin-2与其他已知的具有重叠功能谱的CC趋化
因子(即Eotaxin、MCP-3、MCP-4和RANTES)表现出相对较低的aa同源性(32%-40%)(3)。
Eotaxin-2的三维结构证实了其存在一个对受体结合很重要的N-环结构和一个参与受体信
号传导的N端α-螺旋(7)。Eotaxin-2和Eotaxin-3是唯一已知的映射到7号染色体的趋化因子
(8-9)。
交叉脱敏(2)和受体中和(4,10,11)的研究表明，Eotaxin-2主要(如果不是完全)通过
CCR3发出信号。CCR3是一种基因多态性的七跨膜G蛋白连接受体，在嗜酸性粒细胞、
嗜碱性粒细胞、Th2淋巴细胞亚群和角质形成细胞中表达(12)。通过CCR3进行信号转导
的特点是肌动蛋白聚合、胞质钙浓度的短暂升高和活性氧的释放。其他能够通过CCR3信
号传导的趋化因子包括Eotaxin、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MIP-1d和RANTES。
Eotaxin-2招募和激活嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞，其效力与Eotaxin相当(1-4)。体
外也观察到对多能造血前体的抑制作用(1)。Eotaxin-2 mRNA在活化的T淋巴细胞(1)、
GM-CSF处理的巨噬细胞(1)和真皮成纤维细胞(13)中表达。在哮喘患者中，Eotaxin-2通
过细胞角蛋白+上皮细胞、CD31+内皮细胞和CD6+巨噬细胞表达(14)。在鼻息肉组织中也
观察到Eotaxin-2转录升高(15)。有证据表明，与Eotaxin相比，Eotaxin-2和MCP-4在嗜酸
性粒细胞增多症的后期表达(16)。钩虫，一种寄生蠕虫，分泌金属蛋白酶，可以裂解和灭
活Eotaxin，但不能灭活Eotaxin-2(17)。这一观察结果以及染色体位置的差异表明，
Eotaxin-2可能已经进化为一种对抗某些寄生虫防御机制的对策，这些防御机制能够逃避
Eotaxin诱导的反应。
I. 背景
Eotaxin-2是一种CC趋化因子，也被称为CCL24、MPIF-2或Ckβ-6，最初是通过对活
化单核细胞文库的大规模cDNA测序发现的(1)，1997年有三个独立的研究小组报道了这一
特征(1-3)。Eotaxin-2在体外(1-4)和体内(5)选择性地招募和激活嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒
细胞，并通过CC趋化因子受体3 (CCR3)发出信号。和Eotaxin一样，Eotaxin-2是嗜酸性
粒细胞增加的潜在因素，如过敏反应和寄生虫感染(关于Eotaxin的综述，见文献6)。
成熟的Eotaxin-2是一种糖基化的93个氨基酸(aa)残基蛋白，是在去除26个aa的信号
肽后产生的。预测分子量为10.6 kDa。Eotaxin-2与其他已知的具有重叠功能谱的CC趋化
因子(即Eotaxin、MCP-3、MCP-4和RANTES)表现出相对较低的aa同源性(32%-40%)(3)。
Eotaxin-2的三维结构证实了其存在一个对受体结合很重要的N-环结构和一个参与受体信
号传导的N端α-螺旋(7)。Eotaxin-2和Eotaxin-3是唯一已知的映射到7号染色体的趋化因子
(8-9)。
交叉脱敏(2)和受体中和(4,10,11)的研究表明，Eotaxin-2主要(如果不是完全)通过
CCR3发出信号。CCR3是一种基因多态性的七跨膜G蛋白连接受体，在嗜酸性粒细胞、
嗜碱性粒细胞、Th2淋巴细胞亚群和角质形成细胞中表达(12)。通过CCR3进行信号转导
的特点是肌动蛋白聚合、胞质钙浓度的短暂升高和活性氧的释放。其他能够通过CCR3信
号传导的趋化因子包括Eotaxin、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MIP-1d和RANTES。
Eotaxin-2招募和激活嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞，其效力与Eotaxin相当(1-4)。体
外也观察到对多能造血前体的抑制作用(1)。Eotaxin-2 mRNA在活化的T淋巴细胞(1)、
GM-CSF处理的巨噬细胞(1)和真皮成纤维细胞(13)中表达。在哮喘患者中，Eotaxin-2通
过细胞角蛋白+上皮细胞、CD31+内皮细胞和CD6+巨噬细胞表达(14)。在鼻息肉组织中也
观察到Eotaxin-2转录升高(15)。有证据表明，与Eotaxin相比，Eotaxin-2和MCP-4在嗜酸
性粒细胞增多症的后期表达(16)。钩虫，一种寄生蠕虫，分泌金属蛋白酶，可以裂解和灭
活Eotaxin，但不能灭活Eotaxin-2(17)。这一观察结果以及染色体位置的差异表明，
Eotaxin-2可能已经进化为一种对抗某些寄生虫防御机制的对策，这些防御机制能够逃避
Eotaxin诱导的反应。
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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人Eotaxin-2抗体包被于微孔板上，样品和标准品
中的人Eotaxin-2会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入生物素化的
抗人Eotaxin-2 检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素标记的辣
根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加入TMB底物溶液
（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用，不可用于体外诊断；
该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
请在试剂盒有效期内使用；
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人Eotaxin-2抗体包被于微孔板上，样品和标准品
中的人Eotaxin-2会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入生物素化的
抗人Eotaxin-2 检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素标记的辣
根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加入TMB底物溶液
（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用，不可用于体外诊断；
该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
请在试剂盒有效期内使用；
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人Eotaxin-2，测定其回收率。回收率范
围在88.9-109.6%，平均回收率在100.7%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人Eotaxin-2，测定其回收率。回收率范围在
86.1-105.3%，平均回收率在92.1%。
C. 灵敏度
人Eotaxin-2的最低可测量（MDD）一般小于2.83 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组人Eotaxin-2蛋白所
校正。
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人Eotaxin-2，测定其回收率。回收率范
围在88.9-109.6%，平均回收率在100.7%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人Eotaxin-2，测定其回收率。回收率范围在
86.1-105.3%，平均回收率在92.1%。
C. 灵敏度
人Eotaxin-2的最低可测量（MDD）一般小于2.83 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组人Eotaxin-2蛋白所
校正。
G. 特异性
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant human: Recombinant mouse:
Eotaxin Eotaxin
Eotaxin-3 Eotaxin-2
MIP-1α (66 aa)
MIP-1α (70 aa)
MCP-3
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant human: Recombinant mouse:
Eotaxin Eotaxin
Eotaxin-3 Eotaxin-2
MIP-1α (66 aa)
MIP-1α (70 aa)
MCP-3
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