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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
Cell culture supernatant, serum
- 标记物:
Total MMP-7
- 应用:
VAL166
- 检测方法:
定量检测天然和重组人 MMP-7 的浓度
- 检测范围:
31.3-2000
- 规格:
96T
Human Total MMP-7 Valukine ELISA Kit
目录号:VAL166
适用于定量检测天然和重组人 MMP-7 的浓度
科研专用,不可用于临床诊断
背景
基质金属蛋白酶(MMPs),也称为基质蛋白酶,构成了一个锌和钙依赖性内肽酶家
族,在细胞外基质(ECM)分解中起作用。它们在许多正常生理过程中发挥重要作用,
如胚胎发育、形态发生、生殖和组织重塑(1)。它们也参与许多病理过程,如关节炎、
癌症和心血管疾病(2)。虽然新合成的基质金属蛋白酶的数量主要在转录水平上受到调
节,但现有基质金属蛋白酶的蛋白水解活性是通过激活酶原以及内源性抑制剂对活性酶的
抑制来控制的,如α2-巨球蛋白和金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)。
MMP-7(matrilysin)在正常和病变组织的上皮细胞中表达(3)。该蛋白在正常组织
中定位于子宫内膜和各种外分泌腺中的分泌和导管上皮。它在多种肿瘤中表达,包括乳腺、
结肠、前列腺、胃、上呼吸道、肺和皮肤。该基因的转录由肠道肿瘤中PEA3亚家族的Ets
转录因子和呼吸道上皮细胞中的铜绿假单胞菌鞭毛蛋白激活(4,5)。缺乏该基因的敲
除小鼠抑制了肠道肿瘤的发生(6)。该基因的过度表达导致乳腺过早分化与男性不育(7)。
MMP-7能够消化细胞外基质的许多蛋白质,如IV型胶原,明胶、层粘连蛋白、聚蛋
白聚糖、肌动蛋白、弹性蛋白和多功能蛋白聚糖。它激活其他蛋白酶,作为尿激酶纤溶酶
原激活剂和前MMP-1、-2和-9,并切割额外的基质,如骨桥蛋白(3、8、9)。除了在结
缔组织重塑和癌症中的作用外,MMP-7还调节先天宿主防御中的肠α-防御素激活,并在
椎间盘突出吸收模型中释放TNF-α(10,11)。MMP-7介导的脂肪酸合成酶配体保护肿
瘤细胞免受化疗药物的细胞毒性,并增强上皮细胞凋亡(12,13)。
在结构上,MMP-7是最小的MMP之一,由两个结构域组成,一个前结构域和一个催
化域(8)。酶原的激活涉及蛋白水解去除含有MMP中保守的半胱氨酸开关基序的N末端
pro区域(14)。由此产生的成熟和活性酶由一个催化结构域组成,该结构域具有锌结合
基序(15,16)。另外,可以通过次氯酸氧化半胱氨酸开关基序来激活酶原(17)。
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人MMP-7抗体包被于微孔板上,样品和标准品中
的人MMP-7会与固定在板上的抗体结合,游离的成分被洗去;接着加入生物素化的抗人
MMP-7检测抗体进行孵育,洗涤去除未结合的物质后,加入链霉亲和素标记的辣根过氧
化物酶(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤去除未结合的试剂后,加入TMB底物溶液。溶液
颜色与结合的目标蛋白成正比;加入终止液;用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用标准品稀释液(1×)稀释后重新检测;
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的储存等。
G. 特异性
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
该试剂盒识别前体和成熟的重组人MMP-7。当与重组人TIMP-1复合时,它还能识别重组
人MMP-7。
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