Human Enolase 2/Neuron-specifi

Human Enolase 2/Neuron-specific Enolase Valukine ELISA kit

目录号：VAL159
适用于定量检测天然和重组人 Enolase 2/Neuron-specific Enolase 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

背景
烯醇化酶2又称γ烯醇化酶或神经元烯醇化酶。烯醇化酶(2-磷酸d甘油酸水解酶)是一
种参与糖酵解途径的细胞质酶，在糖酵解途径中，它将2-磷酸甘油酸转化为磷酸烯醇丙tong
酸。它有三个成员：烯醇化酶1、烯醇化酶2和烯醇化酶3，分别被称为α、γ和β烯醇化酶。
它们以多种二聚体同工酶的形式存在，包括αα、αβ、ββ、αγ和γγ。αγ和γγ同工酶在神经
元和神经内分泌细胞中大量存在，因此它们也被称为神经元特异性烯醇化酶(NSE) (1-2)。
人烯醇化酶2的氨基酸长度为434个，与人烯醇化酶1和3的氨基酸同源性为83%，与小鼠
烯醇化酶同源性为99%。
正常人血清烯醇化酶2水平较低，然而，当神经元损伤时，它会由损伤细胞释放到脑
脊液和体循环中。研究表明，烯醇化酶 2的血清水平升高常见于各种与中枢神经系统损伤
有关的疾病，如中风、创伤性脑损伤、多发性硬化症和阿尔茨海默病 (3-6)。在神经内分
泌来源的恶性肿瘤中，烯醇化酶2的产生增加，这通常也会导致血清烯醇化酶2水平升高
(7)。例如小细胞肺癌、APUDoma和神经母细胞瘤 (8-11)。

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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人Enolase 2/Neuron-specific Enolase抗体包被
于微孔板上，样本和标准品中的人Enolase 2/Neuron-specific Enolase会与固定在板上的
抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入生物素化的抗人Enolase 2/Neuron-specific
Enolase检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素标记的辣根过氧
化物酶（Streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加入TMB底物溶液（显色
剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人Enolase 2/Neuron-specific Enolase，
测定其回收率。回收率范围在98.5-108.8%，平均回收率在105.6%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人Enolase 2/Neuron-specific Enolase，测定
其回收率。回收率范围在88.9-99.2%，平均回收率在94.5%。
C. 灵敏度
人Enolase 2/Neuron-specific Enolase的最低可测剂量（MDD）一般小于7.81 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此 ELISA 试 剂 盒 经 由 R&D Systems 生 产 的 大 肠 杆 菌 表 达 的 高 纯 度 重 组 人 Enolase
2/Neuron-specific Enolase蛋白所校正。

G. 特异性
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant human:
Enolase 1
Enolase 3
PGK-1
PKM2