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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
Cell culture supernatant, serum
- 标记物:
CCL4/MIP-1 β
- 适应物种:
Hu
- 应用:
VAL161
- 检测方法:
天然和重组人 CCL4/MIP-1β的浓度
- 检测范围:
31.3-2000 (cell culture supernatant) , 62.5-4000 (serum)
- 规格:
96t
Human CCL4/MIP-1 β Valukine ELISA Kit
人 CCL4/MIP-1β ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号:VAL161
适用于定量检测天然和重组人 CCL4/MIP-1β的浓度
科研专用,不可用于临床诊断
有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效
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I. 背景
CCL4,也被称为巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β),是一种7.8 kDa的β趋化因子,在
炎症部位由活化的白细胞、淋巴细胞、血管内皮细胞和肺平滑肌细胞分泌(1,2)。CCL4
将多种免疫细胞吸引到微生物感染部位,以及其他病理性炎症部位,如过敏性哮喘和缺血
性心肌(3-8)。小鼠CCL4缺乏会促进自身抗体的产生,这可能是调节性T细胞募集受损
的结果(6)。CCL4是由活化的单核细胞分泌,与CCL3/MIP-1α形成异质二聚体(9)。
人CCL4的前两个N端氨基酸可以被CD26/DPPIV切割(10, 11)。其全长和截短形式都是
通过CCR5发挥生物活性,截短的形式还与CCR1和CCR2b相互作用(10)。在人类中,
CCL4结合CCR5的能力可以抑制M-tropic HIV-1进入细胞,而M-tropic HIV-1利用CCR5
作为一种共受体(2)。两种形式的CCL4通过诱导CCR5的下调来阻断HIV-1对T细胞的感
染(10)。成熟的人CCL4与小鼠和大鼠CCL4的氨基酸序列同源性分别为77%和80%。
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人CCL4/MIP-1β抗体包被于微孔板上,样品和标
准品中的人CCL4/MIP-1β会与固定在板上的抗体结合,游离的成分被洗去;接着加入生物
素化的抗人CCL4/MIP-1β检测抗体进行孵育,洗涤去除未结合的物质后,加入链霉亲和素
标记的辣根过氧化物酶(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤去除未结合的试剂后,加入TMB
底物溶液(显色剂)。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比;加入终止液;用酶标仪测定吸
光度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用试剂稀释液(1×)或标准品稀释液(1×)
稀释后重新检测;
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人CCL4/MIP-1β,测定其回收率。回收率
范围在70.7-92.5%,平均回收率在81.1%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人CCL4/MIP-1β,测定其回收率。回收率范围
在82.5-121.6%,平均回收率在101.4%。
C. 灵敏度
人CCL4/MIP-1β的最低可测量(MDD)一般小于6.02 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组人CCL4/MIP-1β
蛋白所校正。
G. 特异性
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant human Recombinant Mouse
GROα MIP-1α
GROβ MIP-1β
GROγ MIP-1γ
MCP-1 MIP-3α
MIP-1α MIP-3β
MIP-1δ Other recombinants
MIP-3α rat MIP-3α
MIP-3β viral MIP-I
RANTES viral MIP-II
含有3.13 ng/mL重组人MIP-1α(70 aa)的样品检测值为56.6 pg/mL(交叉反应率为1.81%)。
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文献和实验Monitoring of Human Immunological Responses to Vaccinia Virus
to smallpox infection has not been fully elucidated, although it is believed that neutralizing antibody plays a major role. This chapter describes a simple enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to quantify vaccinia virus antibody titer. Additionally
在相同的酶。另外,它的相应底物易于制备和保存,价格低廉,有色产物易于测定等。 在ELISA中,常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP)。在少数商品ELISA试剂中,应用的酶尚有葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶和脲酶等。国产ELISA试剂一般都用HRP制备结合物。HRP是一种糖蛋白,含糖量约为18%,分子量为44000,是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成,是一种卟啉蛋白
时对一个样本中的75个目的蛋白进行精确定量。2、样本需要量小。仅需要50μL溶液就可进行一次检测。3、更高的灵敏度。分析灵敏度高达2.8pg/mL。4、更高的灵敏度、更宽的检测范围和更好的重复性。CBA技术使蛋白定量的分析灵敏度高达pg/ml级别,检测范围达0-5000pg/ml,所有分析只需一组标准曲线。根据抗体的荧光强度对目的蛋白定量,排除了ELISA反应中酶联放大产生的假阳性。5、检测对象的灵活组合—BD CBA Flex Set。CBA kit是同时检测试剂盒配好的6个指标,形式比较固定
技术资料暂无技术资料 索取技术资料








