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- 2025年11月05日
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AAT
钙黄绿素, AM
| 货号 | 22002 | 存储条件 | F/L |
| 规格 | 1 mg | ||
| Ex (nm) | 495 | Em (nm) | 515 |
| 分子量 | 994.86 | 溶剂 | DMSO |
简要概述
钙黄绿素, AM是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活力测定的试剂，钙黄绿素，也称为荧光素，荧光素复合物，是一种荧光钙指示剂，其激发和发射波长分别为495和515nm。钙黄绿素在100 mM以上的浓度下会自动猝灭。它用作EDTA滴定钙离子和荧光测定钙的络合指示剂，微溶于水。质子解离常数为pKa1的= 2.1，pKa2 = 2.9，pKa3 = 4.2，pKa4 = 5.5，pKa5 = 10.8和pKa6 = 11.7。钙黄绿素溶液在酸性条件下发出黄绿色荧光，而在碱性条件下不发出荧光。但是，钙黄绿素在碱性条件下在金属离子（例如Al，Ba，Cu，Mg和Zn）存在下发出荧光。因此，钙黄绿素还可以用于除Ca之外的这些重金属离子的直接荧光滴定。百萤生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙黄绿素。
产品光谱图
产品说明书
使用细胞活力指标AM酯类
AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们在溶液中易于水解。 它们应在使用前用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）溶解。 DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯可以稳定数月。
以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
a）在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。
注意：在稀释到上样缓冲液中之前，可将等体积的20％Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。最终的Pluronic®F-127浓度约为0.02％。
注意：不建议长期储存含有Pluronic®F-127的AM酯。
b）在实验当天，要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中，要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系，建议最终浓度范围为4至5μM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。
c）如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以在细胞培养基中加入丙磺舒（1-2.5 mM）或磺吡酮（0.1-0.25 mM），以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。
d）在不含细胞活力指示剂的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂）中洗涤细胞以除去过量的探针。
注意：通过流式细胞术立即分析细胞样品，以保证每个细胞的平均荧光。
e）在所需的Ex / Em波长下进行实验 。
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IntroductionLuciferase can be used as a reporter gene to measure the activity of promoters, and/or the transfection efficiency.AimsYou will be provided with the HEK293/COS cells that you transfected on Monday. Working in groups
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
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