Human/Monkey IL-10 Valukine EL

Human/Monkey IL-10 Valukine ELISA Kit

人/猴 IL-10 ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL112
适用于定量检测天然和重组人/猴白介素 10（IL-10）的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

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I. 背景
人白细胞介素10（IL-10），又称为细胞生长因子合成抑制因子（CSIF），是IL-10α
螺旋家族的成员，该家族还包括IL-19、IL-20、IL-22、IL-24 和IL-26/AK155（1-3）。
IL-10可由多种活化的造血细胞、肝星状细胞、角质形成细胞和胎盘滋养叶细胞分泌。
人类IL-10对小鼠细胞有活性，而小鼠IL-10不能作用于人的细胞（4, 5）。成熟的人IL-10
与马IL-10有86%的氨基酸序列同源性，与牛、犬、猫、豚鼠、小鼠、绵羊、猪和大鼠IL-10
的同源性在72-80%之间。它包含两个链内二硫键，以非共价结合的同源二聚体形式表
达，分子量36 kDa（4, 6, 7）。
IL-10通过由II型细胞因子IL-10受体亚基α和β异源二聚体复合物介导其生物活性。
IL-10受体亚基是一个110 kDa的跨膜糖蛋白，主要表达于淋巴细胞、NK细胞、巨噬细
胞、单核细胞、星形胶质细胞、肠上皮细胞、滋养层细胞和活化的肝星状细胞（8-13），
而75 kDa的跨膜受体β则广泛表达（14, 15）。IL-10二聚体结合两个IL-10 Rα链，激发
两个IL-10 Rβ链的加入（14, 15）。IL-10 Rβ不直接结合IL-10，但为信号转导所需要。
IL-10 Rβ还与IL-20 Rα、IL-22 Rα1及IL-28 Rα形成IL-22、IL-26、IL-28和IL-29的受体复
合物（16-18）。
IL-10参与的免疫调节包括抑制作用和刺激作用。它通过抑制Th1细胞和Th17细胞
的扩增和活化（19-21），促进M2型巨噬细胞（21）发挥抗炎作用。免疫调节T细胞（Treg）
和调节性B细胞对IL-10表达的调节对Treg增殖有重要意义（19）。然而，在肿瘤环境中，
IL-10抑制Treg及髓源性抑制细胞的增殖（22, 23）。IL-10诱导CD8+ T细胞在肿瘤中的
积累和活化（24, 25）。IL-10通过限制关节炎的组织损伤（19），促进肌肉损伤后再生
（21）发挥保护作用，但它可能导致病毒感染的持久性（26）。IL-10水平在干燥综合
征（唾液）、原发性中枢神经系统淋巴瘤（脑脊液）、卵巢癌（血清和腹水）（27-29）
中升高。其水平在心脏病复发或子痫前期患者血清和男性不育患者精液中降低（30-32）。

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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗IL-10抗体包被于微孔板上，样品和标准品中的
IL-10会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；加入辣根过氧化酶标记的抗IL-10
抗体，与结合在微孔板上的IL-10结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去；加入TMB
底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定
吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人/猴血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等

A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的三个样本，在同一板内分别检测20次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板间分别检测40次，以确定板间精确度。
板内精确度 板间精确度
样本 1 2 3 1 2 3
数量 20 20 20 40 40 40
平均值 (pg/mL) 24.4 79.6 223 23.6 74.2 227
标准差 1.6 3.9 5.5 1.8 4.9 12.7
CV% 6.6 4.9 2.5 7.6 6.6 5.6
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的IL-10，测定其回收率。回收率范围在
88-110%，平均回收率在98%。
在人血清样本中掺入不同水平的IL-10，测定其回收率。回收率范围在77-85%，平均回
收率在80%。
在猴血清样本中掺入不同水平的IL-10，测定其回收率。回收率范围在73-105%，平均
回收率在95%。

C. 灵敏度
IL-10的最低可测剂量（MDD）一般小于3.9 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems®生产的Sf 21表达的高纯度重组人IL-10蛋白所校正。

G. 特异性
此ELISA法可检测天然及重组IL-10蛋白。将以下因子用稀释液（1×）配制成50 ng/mL
的浓度来检测与IL-10的交叉反应。将50 ng/mL的干扰因子掺入中间范围的重组人IL-10
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对照品中，来检测对IL-10的干扰。没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant Human Recombinant Mouse
IL-10 (cytomegalovirus) IL-10
IL-10 Rα IL-10 Rα
IL-10 Rβ/Fc Chimera
Other Recombinants
Canine IL-10 Porcine IL-10
Equine IL-10 Rat IL-10
Feline IL-10 Viral IL-10 (Epstein-Barr)