Human IL-13 Valukine ELISA Kit

Human IL-13 Valukine ELISA Kit

人 IL-13 ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL126
适用于定量检测天然和重组人 IL-13 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

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I. 背景
白细胞介素-13 (IL-13)是一种 17 kDa 的单分子免疫调节细胞因子，在过敏、癌症和组织
纤维化的发病机制中起着关键作用。它由几个辅助 T 细胞亚群、NK 细胞、肥大细胞、嗜
酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和内脏平滑肌细胞分泌(1-3)。成熟的人 IL-13 与小鼠和大鼠
IL-13 有大约 58%的氨基酸序列相同。尽管同源性较低，但它在人类、小鼠和大鼠之间表
现出跨物种活性(4)。IL-13 抑制巨噬细胞、成纤维细胞和内皮细胞产生促炎细胞因子和其
它细胞毒性物质。在 B 细胞中，它促进细胞活化，免疫球蛋白类转换为 IgE，并上调
CD23/Fc epsilon RII(1,5)。
IL-13 和 IL-4 的生物学效应在一定程度上与共同的受体系统密切相关。IL-13 低亲和力结
合跨膜 IL-13 Ra1 接着与跨膜 IL-4 Ra 形成信号复合物(6-8)。这种高亲和力受体复合物也
起着 2 型 IL-4 受体的作用(6,7)。细胞表面表达及可溶形式的 IL-13 Ra2 与 IL-13 高亲和
力结合(9,10)，且可作为诱骗受体阻断 IL-13 通过 IL-13 Ra1/IL-4 Ra 复合物的信号传递
(11,12)。它还通过阻断 IL-4-占据的 IL-13 Rα1 / IL-4 Rα受体复合物的信号来抑制 IL- 4 响
应(12,13)。此外，IL-13 结合的 IL-13 Ra2 可直接促进肿瘤细胞侵袭性和组织纤维化的发
展(14-16)。

II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心 ELISA 法。抗人 IL-13 捕获抗体包被于微孔板上，经过孵育，样
品和标准品中的 IL-13 会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入生物素
化的抗人 IL-13 检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素标记的辣
根过氧化物酶(streptavidin-HRP) 孵育。洗涤后，加入显色底物，避光显色。溶液颜色与
结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检
测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、
洗板技术、反应时间或温度、试剂盒的储存等。

III. 优势
A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的三个样本，在同一板内分别检测 20 次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板中分别检测 20 次，以确定板间精确度。
细胞培养上清/血清
板内精确度 板间精确度
样本 1 2 3 1 2 3
平均值（pg/mL） 206.0 798.6 3167.8 211.4 798.7 3062.9
标准差 6.5 15.8 68.3 6.9 16.0 105.6
CV% 3.2 2.0 2.2 3.3 2.0 3.4
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人 IL-13，测定其回收率。回收率范围在
93.0-104.2%，平均回收率在 97.1%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人 IL-13，测定其回收率。回收率范围在
97.8-109.5%，平均回收率在 99.4%。
C. 灵敏度
人 IL-13 的最低可测剂量（MDD）一般小于 22.52 pg/mL。
MDD 是根据 20 个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
D. 校正
此 ELISA 试剂盒经由 R&D Systems®生产的大肠杆菌表达的高纯度重组人 IL-13 蛋白所
校正。