Human MCP-1 Valukine ELISA Kit

Human MCP-1 Valukine ELISA Kit

目录号：VAL134
适用于定量检测天然和重组人 CCL2/MCP-1 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

I. 背景
趋化因子(C-C基元)配体2 (CCL2)，又称为单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、或MCAF
和TDCF，是一种肝素结合的，趋化因子β或CC家族的，10-14kDa成员。目前，至少有
26个人类CC家族成员的大小在8-12kDa之间。这些趋化因子大多存在于人体17号染色
体上，均含有典型的3个β-折叠和1个α-螺旋结构(1-3)。人CCL2 cDNA编码99个氨基酸
(aa)的前体蛋白，其中含23个aa信号肽和76个aa成熟蛋白(1)。人成熟CCL2与犬、猪和
马CCL2共有78-79%的aa同源性，而小鼠和大鼠表达一种仅49个aa的CCL2，在共同区
域只有约56%的aa同源性。然而，人CCL2可在小鼠细胞中诱导应答(4)。成纤维细胞、
胶质瘤细胞、平滑肌细胞、内皮细胞、淋巴细胞和单核吞噬细胞可以产生组成型的，或
在有丝分裂刺激下的CCL2，但单核细胞和巨噬细胞似乎是其主要来源(1, 5)。CCL2除
了具有趋化活性外，还诱导单核细胞、NK细胞和淋巴细胞释放酶和细胞因子，以及诱
导表达其受体CCR2的嗜碱性粒细胞释放组胺(1)。此外，它还促进CD4+T细胞中Th2的
极化(6)。CCL2介导的单核细胞向炎症部位的募集被认为在动脉粥样硬化、多发性硬化
和过敏性哮喘的病理过程中起作用(7, 8)。

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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人CCL2/MCP-1抗体包被于微孔板上，样品和
标准品中的人CCL2/MCP-1会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入
生物素化的抗人CCL2/MCP-1检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉
亲和素标记的辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，
加入TMB底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶
标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

III. 优势
A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的三个样本，在同一板内分别检测20次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板中分别检测20次，以确定板间精确度。

B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人CCL2/MCP-1，测定其回收率。回收
率范围在97.3-123.1%，平均回收率在109.5%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人CCL2/MCP-1，测定其回收率。回收率范
围在82.1-114.3%，平均回收率在98.9%。
C. 灵敏度
人CCL2/MCP-1的最低可测剂量（MDD）一般小于2.9pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组人CCL2/MCP-1
蛋白所校正。