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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
VAL120
- 样本:
Cell culture supernatant, serum
- 标记物:
C-Reactive Protein(CRP)
- 适应物种:
Hu
- 应用:
ELISA Kit
- 检测方法:
elisa
- 检测范围:
15.63-1000
- 规格:
96T
Human C-Reactive Protein(CRP) Valukine ELISA Kit
人 C 反应蛋白(CRP)ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号:VAL120
适用于定量检测天然和重组人 C 反应蛋白(CRP)的浓度
科研专用,不可用于临床诊断
有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效
背景
C 反应蛋白(CRP),也被称为 Pentraxin 1,是 Pentraxin 家族中的一种非糖基化蛋白,
此家族还包括 Pentraxin 2/SAP 和 Pentraxin 3/TSG-14。CRP 是天然免疫应答的传感
器和激活因子(1)。是人体中一种主要的急性期蛋白,在炎症开始时其循环浓度显著升高
(2)。而小鼠血清中 CRP 水平在炎症过程中仅略有升高,类似的急性期作用由 Pentraxin
2 填补(3)。CRP 结合、调理并诱导吞噬细菌和凋亡细胞 (4, 6-8)。它通过结合补体级联
中的几个蛋白以及巨噬细胞和树突状细胞上的 Fc - RI、Fc - RIIA 和 Fc - RIIB 来调控经
典补体通路的激活(6, 7, 9-11, 12-14)。它还促进树突状细胞的成熟和体液免疫(8)。在心
血管疾病中,CRP 与氧化 LDL 结合,加重心肌梗死组织损伤,抑制受损血管内皮的修
复(5, 15, 16)。
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心 ELISA 法。抗人 CRP 捕获抗体包被于微孔板上,经过孵育,样
品和标准品中的 CRP 会与固定在板上的抗体结合,游离的成分被洗去;接着加入生物
素化的抗人 CRP 检测抗体进行孵育,洗涤去除未结合的物质后,加入链霉亲和素标记
的辣根过氧化物酶(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤去除未结合的试剂后加入 TMB 底物溶
液(显色剂)。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比;加入终止液;用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用试剂稀释液(1×)稀释后重新检
测;
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、
洗板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等
优势
A. 精确度
板内精确度(同一板内不同孔间的精确度)
已知浓度的三个样本,在同一板内分别检测 20 次,以确定板内精确度。
板间精确度(不同板之间的精确度)
已知浓度的三个样本,在不同板中分别检测 20 次,以确定板间精确度。
板内精确度 板间精确度
样本 1 2 3 1 2 3
平均值(pg/mL) 52.3 207.5 854.4 51.7 204.3 874.0
标准差 1.3 9.6 46.7 1.5 8.0 55.2
CV% 2.6 4.6 5.5 3.0 3.9 6.3
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人 CRP,测定其回收率。回收率范围
在 84.1-87.8%,平均回收率在 86.9%。
C. 灵敏度
人 CRP 的最低可测剂量(MDD)一般小于 5.11 pg/mL。
MDD 是根据 20 个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相
对应浓度。
D. 校正
此 ELISA 试剂盒经由 R&D Systems®生产的 NS0 表达的高纯度重组人 CRP 蛋白所校
正。
E. 线性
不同的样本中含有或掺入高浓度的人 CRP,然后用试剂稀释液(1×)将样本稀释到检
测范围内,测定其线性。
F. 样本值
使用本试剂盒检测了 5 份人血清样本中 CRP 的水平。5 份样本的检测值在 8156-13436
ng/mL 之间,平均值为 9710 ng/mL。
G. 特异性
此 ELISA 法可检测天然及重组人 CRP 蛋白。对制备的 50ng/mL 的下列因素进行了测
定,无交叉反应或干扰。
Recombinant human: Other recombinants:
Pentraxin 2 Mouse CRP
Pentraxin 3 Porcine CRP
Rat CRP
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文献和实验Substrate Tablete(antibody developed in goat) St. Louis,Mo 63178, USAAffinity isolated antibody adsorbed Lot # 043H6178With bovine horse and human serum protein Cat # 0h176Lot # 055H4835Lot # A-2179Tween 80Laboratories ,Detroit,Michigan ,USA1 drop of Tween
一篇文献中的ELISA方法如下:Control peptides (14–17 amino acid sequence near the N-terminal or C-terminal of the studied protein) and the reactive rabbit anti-defensin antibodies (affinity pure) were obtained from Alpha Diagnostics .CoStar flat-bottom high
Identifying Small‐Molecule Modulators of Protein‐Protein Interactions
interactions. Nat. Biotechnol. 18:847‐851. Ramani, A.K., Bunescu, R.C., Mooney, R.J., and Marcotte, E.M. 2005. Consolidating the set of known human protein‐protein interactions
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