Human CCL3/MIP-1α ELISA Kit

Human CCL3/MIP-1α  ELISA Kit

人 CCL3/MIP-1α ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL177
适用于定量检测天然和重组人 CCL3/MIP-1α的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

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I. 背景
巨噬细胞炎症蛋白-1α (MIP-1α) 是趋化因子β或CC亚家族的成员。其他的趋化因子
亚族，根据它们的半胱氨酸基序分类，包括α或CXC和γ或C亚族。趋化因子具有20%到90%
以上的氨基酸序列同源性。大多数趋化因子已被证明具有趋化活性，并在免疫调节和炎症
过程中发挥关键作用(1-3)。人类MIP-1α cDNA编码一个92 aa残基前体蛋白和一个22 aa
残基信号肽，该肽被裂解成分泌的成熟蛋白。MIP-1α由活化的T细胞、B细胞、单核细胞、
肥大细胞、中性粒细胞、朗格汉斯细胞、星形胶质细胞、内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌
细胞产生(2-7)。MIP-1α基因已与所有其他人类β趋化因子基因一起定位到17号染色体(2)。
与其他β趋化因子一样，MIP-1α是单核细胞趋化因子(1, 2)。此外，也有报道称MIP-1α
对T淋巴细胞、NK细胞、细胞毒性T细胞、B细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞具有不
同的趋化和促粘附作用(8-13)。MIP-1α已被鉴定为一种干细胞抑制剂(SCI)，可在体内外
抑制造血祖细胞的增殖(14-16)。MIP-1α、MIP-1β和RANTES被认为是CD8+ T细胞产生的
主要HIV抑制因子(17)。

概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。羊抗人CCL3/MIP-1α抗体包被于微孔板上，样本和
标准品中的人CCL3/MIP-1α会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入
生物素化的抗人CCL3/MIP-1α检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉
亲和素标记的辣根过氧化物酶（streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加
入TMB底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标
仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的储存等。

B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人CCL3/MIP-1α，测定其回收率。回收
率范围在93.7-105.7%，平均回收率在98.7%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人CCL3/MIP-1α，测定其回收率。回收率范
围在88.4-103.6%，平均回收率在98.3%。
C. 灵敏度
人CCL3/MIP-1α的最低可测量（MDD）一般小于0.27 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此 ELISA 试 剂 盒 经 由 R&D Systems 生 产 的 大 肠 杆 菌 表 达 的 高 纯 度 重 组 人 含 66aa 的
CCL3/MIP-1α (Catalog # 270-LD) 蛋 白 所 校 正 。 此 试 剂 盒 已 被 证 明 能 识 别 重 组 人
CCL3/MIP-1α含70aa和66aa的两种变体。

G. 特异性
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant human Recombinant Mouse Other recombinants
MIP-1β MIP-1α rat MIP-3α
MIP-1δ MIP-1β viral MIP-I
MIP-3α MIP-1γ viral MIP-II
MIP-3β MIP-3β