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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
VAL152
- 灵敏度:
0.625-40 ng/ml
- 样本:
Cell culture supernatant, serum
- 标记物:
Hyaluronan
- 适应物种:
Cell culture supernatant, serum
- 检测方法:
VAL152
- 检测范围:
0.625-40 ng/ml
- 规格:
96T
Hyaluronan Valukine ELISA Kit
适用于定量检测天然和重组 Hyaluronan 的浓度
科研专用,不可用于临床诊断
I. 背景
透明质酸(HA),也称为玻尿酸或透明质酸钠,是一种天然存在的高度水合线性聚合
物,由重复的双糖D-葡萄糖醛酸-β-1, 3-N-乙酰氨基葡萄糖-β-1, 4组成(1-6)。它是一种
广泛存在于所有脊椎动物细胞外基质中的糖胺聚糖(GAG)。与硫酸软骨素、硫酸皮肤素
和硫酸乙酰肝素等其他GAG不同,HA缺乏硫酸基团,几乎从不与其他蛋白质共价结合(3,
6, 7)。哺乳动物HA由三种不同的跨膜HA合成酶HAS1、2和3中的一种合成(1-4, 7, 8)。
在HA合成过程中,随着UDP糖底物的加入,生长的聚合物通过膜转移到细胞外表面(7)。
三种HA合成酶的表达模式和合成速率不同,可能产生不同链长的HA聚合物(8)。通常,
HA合成酶产生高分子量HA (HMW,>500 kDa),而降解是低分子量HA片段(LMW,<500
kDa)的主要来源。HA在哺乳动物中通过一系列透明质酸酶的协同作用迅速转化,并被
肝脏和肾脏清除(1, 3, 5, 7,9 )。
HA在细胞外基质的水化、细胞粘附和迁移的组织中非常重要(1, 6, 7)。它与大量透
明质酸结合蛋白或透明质粘着蛋白相互作用。在细胞外基质中,HA能结合链接蛋白,
如软骨中的aggrecan和HAPLN1,平滑肌中的versican,大脑中的brevican,以及神经
组织中的neurocan (1, 6, 7, 10)。在循环中,它结合血浆结合蛋白,如ITIH1/2、TSG-6
和HABP1/C1qBP (1, 3, 5, 7, 10)。HA结合许多细胞表面受体,如广泛表达的CD44、血
管内皮细胞和其他细胞上的RHAMM、淋巴管内皮细胞上的LYVE-1,以及内皮窦(如淋
巴结和肝脏)中的内吞受体Stabilin-2 (5-7, 10)。髓细胞TLR2和TLR4也结合LMW-HA
片段 (11-13)。
通过HA受体激活的细胞信号通路部分依赖于HA的大小(4, 6, 8, 10-13)。虽然
HMW-HA被认为具有抗血管生成、抗炎和免疫抑制作用,但LMW-HA具有高度的血管
生成和促炎症作用,并促进树突状细胞成熟(1, 4-6, 12, 14)。HA主要由成纤维细胞产生,
有助于成纤维细胞产生炎症介质并向纤维化区域迁移(1, 6)。在老化的动脉壁中,主动
脉平滑肌和成纤维细胞的生成增加(6, 15)。HA促进胚胎干细胞向中胚层和心脏的分化,
以及体外造血干细胞向造血细胞的分化(1)。血浆HMW-HA主要来自淋巴循环(7)。在血
管病、肝纤维化、自身免疫性疾病如晚期硬皮病、类风湿性关节炎和狼疮性肾炎、终末
期肾功能衰竭、特发性肺动脉高压、成人呼吸窘迫综合征以及血糖控制不佳的糖尿病患
者中升高(1, 15, 16)。HA作为药物载体用于治疗,并注射到病变关节中以增加水合作用
和抑制炎症(5, 17, 18)。它通过清除活性氧来保护组织;然而,活性氧也会导致HA碎裂,
导致炎症(1)。HMW-HA与CD44结合促进调节性T细胞的活性,从而控制炎症(14, 19)。
HA促进上皮细胞向间充质细胞的转化,无论是在发育过程中还是在致癌转化过程中(1,
7, 20)。癌细胞经常产生透明质酸酶降解HA,促进血管生成和炎症(4, 2
本实验采用夹心ELISA法。重组人Aggrecan包被于微孔板上,样品和标准品中的
Hyaluronan会与固定在板上的重组人Aggrecan结合,游离的成分被洗去;接着加入生
物素化重组人Aggrecan进行孵育,洗涤去除未结合的物质后,加入链霉亲和素标记的
辣根过氧化物酶(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤去除未结合的试剂后,加入TMB底物
溶液(显色剂)。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比;加入终止液;用酶标仪测定吸光
度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清样本和血清样本;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用试剂稀释液(1×)稀释后重新检测;
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等
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文献和实验RAT/MOUSE GROWTH HORMONE ELISA KIT
实验原理 This assay is a Sandwich ELISA based, sequentially, on: 1) capture of rat or mouse Growth Hormone molecules from samples to the wells of a microtiter plate coated by a pre-titered amount of anti-Growth Hormone
licanming 请问有无人用过assaydesigns公司的PKC Kinase Activity Assay Kit(cat NO:EKS-420A)?可否说一下应用的经验?注意事项等?还有,该试剂盒的说明书有几处地方不是很懂,请大家帮忙看一下: 1、To avoid cross contamination, change disposable pipette tips between the addition of each standard
Charting Methods for Internal Quality Control for Competition ELISA
. This assay is available in a kit form. Constant evaluation of the use of the kit is part of what is called internal quality control (IQC). Figure 1 shows an overview of the ELISA scheme described in this chapter. The details of the procedure, which involves
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