Human Neuropilin-1 Valukine EL

Human Neuropilin-1 Valukine ELISA Kit

适用于定量检测天然和重组人 Neuropilin-1 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

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I. 背景
Neuropilin-1（Npn-1或Nrp1），也被称为CD304，是一种约140 kDa的跨膜糖蛋白，
可作为许多细胞外配体的协同受体。人Npn-1蛋白的923氨基酸（aa）序列与小鼠和大鼠
同源序列具有93%的同源性（1）。Npn-1包含有两个N端CUB结构域（称为a1a2）的一
个大的胞外域（ECD），两个与凝血因子V和VIII同源的结构域（称为b1b2），和一个MAM
结构域（称为c）（1, 2）。其短细胞质尾区被认为通过与含有PDZ域的蛋白GIPC1结合
来介导信号转导（2-4）。Npn-1通常表达为同型二聚体，尽管它也可以与Npn-2形成异二
聚体（5）。Npn-1的二聚作用是通过MAM构域介导的（4）。
Npn-1表达于神经元、黑素细胞、角质形成细胞以及乳腺、子宫、肾脏、肺、胰腺和
胃肠道的上皮细胞上（2, 5-8）。它也被证明在一些免疫细胞类型的表面表达，包括浆细
胞样树突状细胞，静止T细胞，自然FoxP3+调节T细胞，和滤泡辅助T细胞亚群（5, 9-12）。
Npn-1参与多种生理过程，包括血管生成、轴突引导、细胞存活和迁移，以及肿瘤细胞侵
袭（5, 7）。它通过其a1a2结构域与包括Sema3A、Sema3B和Sema3F在内的几种III类
信号素结合（14, 15）。它还与A型丛蛋白相互作用，诱导轴突排斥和生长锥坍塌（13, 16）。
Npn-1也通过其b1b2结构域与VEGF家族的肝素结合成员（VEGF165，VEGF-B，VEGF-E，
和PlGF-2）相互作用（2, 7, 14, 17, 18）。
Npn-1在多种癌症中也有表达，它参与介导肿瘤细胞的增殖、存活、迁移和侵袭（6, 17,
19-25）。此外，其表达水平已被证明与肿瘤的侵袭性、疾病分期和不良的临床预后相关
（5, 21-24）。

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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人Neuropilin-1抗体包被于微孔板上，样品和标
准品中的人Neuropilin-1会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入生物
素化的抗人Neuropilin-1检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素
标记的辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加入TMB
底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸
光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人Neuropilin-1，测定其回收率。回收率
范围在83.7-122.2%，平均回收率在99.8%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人Neuropilin-1，测定其回收率。回收率范围
在83.7-121.1%，平均回收率在107.4%。
C. 灵敏度
人Neuropilin-1的最低可测剂量（MDD）一般小于3.94 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的NS0表达的高纯度重组人Neuropilin-1蛋白所
校正。