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一种即用型蛋白酶抑制剂混合浓缩原液(200X,溶于DMSO,无EDTA)相当于Sigma P1860,用于组织培养基,抑制分泌蛋白降解
- 英文名:
Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-Free, 200X in DMSO)
- 库存:
2
- 供应商:
研卉生物
- CAS号:
K1008
- 保存条件:
10*1ml
- 规格:
10*1ml
Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-Free, 200X in DMSO),即用型蛋白酶抑制剂混合浓缩原液
在体外从培养基中提取分泌的蛋白质时,蛋白质产生停止,降解增加。细胞粗提取物中含有许多能够降解提取物中蛋白质的内源性酶,如磷酸酶和蛋白酶。提高完整蛋白质产量的最佳方法是加入已知存在的那些酶的抑制剂。
Protease Inhibitor Cocktail用于组织培养基以提高蛋白质的稳定性。该cocktail起到抑制降解非磷酸化或磷酸化蛋白质底物的蛋白酶的作用。这个cocktail用作组织培养基的补充物,以阻止分泌蛋白的降解。
该Protease Inhibitor Cocktail包含单独的组分,包括Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin和Pepstatin A,这些物质对半胱氨酸、丝氨酸、天冬氨酸和氨基肽酶具有广谱特异的抑制性。已经用组织培养基对这种蛋白酶抑制剂cocktail进行了优化和测试。该蛋白酶抑制剂cocktail溶剂为DMSO,作为即用型溶液提供。
常见问题
1)Q:实验中经常用PMSF来保护蛋白,蛋白酶抑制剂Cocktail和它比有什么优势?
A:PMSF只能抑制一种蛋白酶(丝氨酸蛋白酶),Cocktail抑制的更全面且更加持久;此外,PMSF毒性较高并且PMSF更容易降解失效。
2)Q:抑制剂Cocktail可以反复冻融吗?
A:可以反复冻融,但是尽量减少反复冻融的次数。
3)Q:应该选择片剂的Cocktail还是溶液型Cocktail?
A:两种类型的产品都含有添加物,片剂中含有若干种公司专利的未经公开的医药成分,而溶液型产品中含有溶剂成分DMSO。一般来说这些添加物是不会影响产品效果的。溶液型需要的加工步骤少,因而质量好价格低。而片剂产品在储存和运输两个环节具有优势。(片剂能够在4°C储存而不需要-20°C)。
4)Q:用了Cocktail,蛋白仍然降解是怎么回事?
A:蛋白酶抑制剂Cocktail作用是保护蛋白免受蛋白酶降解,提高蛋白得率。对于绝大多数蛋白,Cocktail都有很好的效果。如果还是出现蛋白得率低的情况,可检查实验操作步骤和设计,减少导致蛋白降解的环节。例如,细胞处理前,先要将Cocktail加入到裂解液中并混匀,收集完细胞后立即加入准备好的裂解液。
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