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- AAT Bioquest
- 美国
- 22200
- 2025年11月19日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
在零下15度以下保存, 避免光照
- 保质期：
1年
- 英文名：
JC-1 [5,5,6,6-Tetrachloro-1,1,3,3-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide] *CAS#: 3520-43-2*
- 库存：
3
- 供应商：
AAT Bioquest
- CAS号：
3520-43-2
- 规格：
5mg
简要概述
线粒体膜电位荧光探针JC-1是美国AAT Bioquest生产的用于线粒体膜电位检测的试剂，JC-1广泛用于通过流式细胞术确定线粒体膜电位。它能够选择性地进入线粒体，并且随着线粒体膜电位增加（超过约80-100mV的值）可逆地将其颜色从绿色变为橙色。这种性质是由于线粒体膜极化后JC-1聚集体的可逆形式导致发射光从530nm（即JC-1单体形式的发射）转变为590nm（即J-聚集形式的发射）。当在490nm处激发时，随着线粒体膜变得更加极化，JC-1的颜色从绿色橙色可逆地变为绿色橙色。使用通常安装在所有流式细胞仪中的滤波器可以检测两种颜色，可以在荧光通道1（FL1）中分析绿色发射，在通道2（FL2）中分析绿色橙色发射。使用JC-1的主要优点是，它可以从绿色到橙色荧光发射转移，它既可以定性，又可以在FL1和FL2通道中检测到纯荧光强度又可以定量。除了广泛用于流式细胞仪外，JC-1还用于荧光成像。我们已经开发出一种在荧光酶标仪平台中使用它的方案，尽管JC-1在许多实验室中被广泛使用，但其水溶性差使得它在某些应用中难以使用。我们的JC-10具有比JC-1更好的水溶性，并且JC-10在一些细胞系中具有优于JC-1的性能。百萤生物是AAT Bioquest的代理商，为您提供的线粒体膜电位荧光探针。
百萤生物公司简介
美国AAT Bioquest公司长年以来与百萤生物互补优势，为国内外广大用户提供光谱检测，底物显色，荧光发光技术等全系列解决方案。近年来，百萤生物已与多家药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系；我们的服务宗旨：为广大科研用户提供更好的服务.
1.更高品质保障的AAT Bioquest产品（AAT Bioquest作为专业的光谱学检测产品生产商，能提供 高性价比的产品）。
2.更低的价格和高性价比的选择，我们将一如既往的为客户和代理商提供售后保障。作为代理，百萤生物给您优惠的折扣和专业的技术支持。
注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其它非科研用途！
产品说明书
JC-1样品分析方案
概述
用测试化合物制备细胞
添加JC-1工作溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）在室温或37℃孵育1小时
移除JC-1工作溶液
读取 Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光强度
注意：以下是我们推荐的活细胞方案。该方案仅提供指南，实际情况应根据您的具体实验进行调整修改。
1.准备JC-1工作溶液：
1.1在高质量无水DMSO中制备2至10 mM JC-1的储备液。 应随用随配及时使用或等分配制，应将使用剩余的溶液等分并在<-20℃冷冻。
注意：避免反复冻融循环，避免光照。
1.2制备1X JC-1工作溶液：在实验当天，将JC-1固体溶解在DMSO中或将等分试样的JC-1储备溶液解冻至室温。在Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或其他缓冲液（pH 7）和0.02％Pluronic®F-127中制备10至30μM1XJC-1工作溶液。
注意：JC-1不溶于水，因此它会在溶液中聚集。 建议在将JC-1工作溶液加载到微孔板之前对其进行过滤。
2.用荧光酶标仪进行JC-1检测：
2.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间（例如，Jurkat细胞可以用喜树碱处理4-6小时）以诱导细胞凋亡。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。
2.2将100μL/孔的96孔板或25μL/孔的384孔板的JC-1工作溶液（来自步骤1.2）加入到细胞板中。
2.3将JC-1加载在37℃，5％CO2培养箱中培养15-60分钟。
注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度，每个实验的孵育时间需要根据相应实验进行控制。
2.4从平板上取下JC-1工作溶液，用HHBS或其他缓冲液清洗细胞。 将100μL/孔的96孔板或25μL/孔的384孔HHBS板加回到细胞板中。
2.5监测Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光变化以进行比率分析。
3.用荧光显微镜或流式细胞仪进行JC-1测定：
3.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间（例如，Jurkat细胞可以用喜树碱处理4-6小时）以诱导细胞凋亡。
3.2离心细胞，每管取1-5×105个细胞。
3.3在500μLJC-1工作溶液中重悬细胞（来自步骤1.2）。
3.4在室温或37°C下避光孵育10至30分钟。
3.5用HHBS或其他缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500μLHHBS中以获得每管1-5×105个细胞。
3.6用荧光显微镜（使用FITC和TRITC滤光片）或流式细胞仪（使用FL1和FL2通道）观察Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光变化。
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文献和实验一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件，发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体膜电位崩溃，细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针，可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态，两者发射光谱不同。在正常细胞内，线粒体膜电位较高，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可产生红色荧光；凋亡早期，线粒体膜电位降低，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体
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染料的浓度，引起假去极化。荧光探针JC-1是一种阳离子型的亲脂性染料，能够自由穿过细胞膜，随细胞膜电位的变化而在膜两侧保持动态平衡。其特点是线粒体膜电位低时浓度低，主要以单体形式存在，488nm激发时最大发射波长为527nm，呈绿色荧光，胞浆相对线粒体为低电位，形成流式图中所有细胞FL1均为阳性；膜电位高时浓度高形成聚集体，488nm激发时的最大发射波长为590nm，红色荧光。活细胞线粒体膜电位高，线粒体内JC-1聚集体的浓度高，红色荧光很强，在流式图上表现为FL1和FL2双阳性，而凋亡细胞则大多
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