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- 2025年11月21日
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-15℃
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24个月
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1
- 供应商：
西安百萤生物科技有限公司
1mM DEAC-dUTP溶液
| 货号 | 17024 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 25 nmoles | ||
| Ex (nm) | 408 | Em (nm) | 470 |
| 分子量 | 945.58 | 溶剂 | Water |
简要概述
产品基本信息
货号：17024
产品名称：1mM DEAC-dUTP溶液
规格：25nmoles
储存条件：-15℃避光干燥
保质期：12个月
产品物理化学光谱特性
分子量：945.58
溶剂：水
激发波长(nm)：408
发射波长(nm)：470
产品介绍
染料修饰的（例如氨基烯丙基-dUTP）可用于通过常规酶促掺入方法（例如逆转录，缺口翻译，随机引物标记或PCR）生产含染料的DNA。这种酶促荧光标记方法广泛用于FISH探针和基于微阵列的实验。该香豆素-dUTP偶联物可与Spectrum Aqua 滤光片组合一起用作蓝色荧光色（Spectrum Aqua 是Vysis的商标）。
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文献和实验
Fluorescent DNA hybridization probe preparation using amine modification and reactive dye coupling
Authors: Cox WG, Singer VL.
Journal: Biotechniques (2004): 114
Aminomodified nucleobases: functionalized nucleoside triphosphates applicable for SELEX
Authors: Schoetzau T, Langner J, Moyroud E, Roehl I, Vonhoff S, Klussmann S.
Journal: Bioconjug Chem (2003): 919
Simple method for preparation of fluor/hapten-labeled dUTP
Authors: Nimmakayalu M, Henegariu O, Ward DC, Bray-Ward P.
Journal: Biotechniques (2000): 518
Topology of yeast RNA polymerase II subunits in transcription elongation complexes studied by photoaffinity cross-linking
Authors: Wooddell CI, Burgess RR.
Journal: Biochemistry (2000): 13405
30分钟，加入DTT使终浓度为1mM,加入吐温-20使体积百分比为0.5%，15000g/4℃/20分钟，得到的上清即粗蛋白。 （3）粗蛋白经中速滤纸过滤后，利用工程菌表达的6His作为纯化标记。上清(补足NaCl至终浓度为0.5M)流过已螯合Ni的Ni-NTA柱，该柱先用10倍床体积结合缓冲液（20mM Tris-HCL,0.5MNaCl,PH8.0, 5mM咪唑）平衡；再用5倍床体积洗涤缓冲溶液（20mM Tris-HCL,0.5MNaCl,PH8.0，15mM/30mM咪唑）依次洗涤；最后
c，用-20度预冷的丙酮冷冻固定10分钟 d，PBS清洗 10minX2 e，用新鲜配制的通透液(含0.1%的Triton X-100和0.1%的柠檬酸钠溶液) 室温通透15min。 f，PBS清洗 10minX2 g. 阳性对照组加入DNase I 40ul(1u/ul)，37度孵育15min h. PBS清洗 10minX2 i. Roehe试剂盒中的的TUNEL反应缓冲液(含FITC标记的dUTP)和脱氧核糖 核酸末端
)和Dig-dUTP(0.35mmol/L),pH6.5(20℃)。 7、聚合酶Ⅰ大片段（标记级）：此管内有25μl 聚合酶Ⅰ大片段（Klenow），2U /μl。 8、（Dig）AP结合物：此管内有200μl多克隆羊抗地高辛配基Fab-片段，结合有碱性磷酸酶750U/ml。 9、NBT：有两管，每管1.25ml，是溶于70%（V/V）二甲基甲酰胺的硝基蓝四唑盐溶液（75mg/ml）。 10、X-磷酸盐：有两管，每管0.9ml，是溶于二甲基甲酰胺的5-溴
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