噻唑蓝

MTT 的操作方法（一）

一、MTT 是什么MTT 是一种粉末状化学试剂，全称为 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。二、MTT 法用来做什么简单地说：是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT 主要有两个用途1．药物（也包括其他处理方式如放射线照射）对体外培养的细胞毒性的测定；2．细胞增殖及细胞活性测定。三、为何 MTT

培养细胞活力测定

培养细胞活力测定是肿瘤体外研究中应用最广的技术手段之一。任何培养瓶内生长的细胞都由死细胞和活细胞组成，从形态上区别死、活细胞是困难的。方法：四唑盐（MTT）比色法四唑盐（MTT）商品名为噻唑蓝四唑盐比色法的原理：活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶干水的蓝紫色产物（formazan），并沉淀在细胞中，而死细胞没有这种功能。二甲亚砜（DMSO）能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物，溶液颜色深浅与所含的formazan（甲月替）量成正比。再用酶标仪测定OD值。MTT法简单快速、准确，广泛应用于新药

药物/毒物作用后的细胞数量测定

四甲基偶氮唑盐分析是将四甲基偶氮唑盐还原成甲蜡的颜色，形成紫色，从而来测定活细胞中的酶活性，由于这些试剂能够抑制细胞的活力和生长特性，该方法常用来测量毒性蛋白以及有毒物质。 一、材料和试剂 1. MTT：四甲基偶氮噻唑蓝（Sigma） 2. DPBS缓冲液（Invitrogen） 3. 一般的化学品（Sigma） 二、步骤 1. 96孔板中，每孔种植500~10 000个细胞，每孔体积200 ul。留8个孔不种植细胞，做空白