- ￥218
- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海翌圣
- 40206ES76
- 2025年10月16日
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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
有效期1年
- 英文名：
MTT Cell Proliferation Assay Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- CAS号：
点击查看
- 保存条件：
4℃避光
- 规格：
500T
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
储存 |
价格（元） |
| MTT Cell Proliferation Assay Kit MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 |
40206ES76 |
500T |
4℃避光 |
229.00 |
| 40206ES80 |
1000T |
4℃避光 |
419.00 |
|
| 40206ES90 |
5000T |
4℃避光 |
1,759.00 |
产品描述
噻唑兰（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT），也称作溴化噻唑蓝四氮唑，是一种黄色染料，已经普遍替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法，用来检测细胞的活力，细胞增殖以及细胞毒性分析。检测原理在于：MTT是一种可接受氢离子的化合物染料，带正电荷，具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的深蓝色MTT-甲臜结晶，而死细胞不具有此功能。甲臜结晶是不能穿透细胞膜，因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。甲臜结晶可用DMSO或者酸化的异丙醇溶解出来，酶标仪下测定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量与活细胞数目成正比，用以评估细胞存活状况。
本试剂盒以MTT（高纯度）作为指示剂，在经典操作步骤的基础上，采用独特的甲臜溶解液配方，可以直接溶解甲臜沉淀，无需去除原有的培养液。从而避免因去除培养液时甲臜被部分去除而引起的操作误差。具有本底低，灵敏度高，线性范围宽，操作简单等特点。另外，本试剂盒还提供配套的一次性针头过滤器和注射器，为实验带来更多的便利。
产品组分
| 编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
||
| 40206ES76（500T） |
40206ES80（1000T） |
40206ES90（5000T） |
||
| 40206-A |
MTT粉末 |
25mg |
50mg |
250mg |
| 40206-B |
MTT溶剂 |
5ml |
10ml |
50ml |
| 40206-C |
甲臜溶解液 |
50ml |
100ml |
100ml×5 |
| 40206-D |
除菌套装 |
1包 |
1包 |
1包 |
运输和保存方法
冰袋运输。
收到产品后，取出除菌套装室温保存，其他组分4℃保存。甲臜溶解液也可以放到室温保存。一年有效。
注意事项
1) 甲臜溶解液具有腐蚀性和毒性，使用时注意防护。
2) MTT有致癌性，应小心操作；MTT溶液需要无菌，因其对菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超过1周，因其可能发生降解，导致检测结果错误。
3) MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT吸光度最好在0-0.7范围内。
4) 使用微孔板进行检测，如果细胞培养时间比较长，需要注意蒸发的问题。一般情况，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，建议弃用周围一圈的方法，改加PBS，水或者细胞培养液等。也可通过将96孔板放在靠近培养箱内水源的位置，以减缓蒸发现象。
5) 甲臜溶解液低温或者常温保存可能会产生沉淀，只需37℃水浴使其充分溶解，混匀后即可使用。
6) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法（以96孔板为例）
细胞生长的培养条件会影响检测效果，因此进行MTT检测时需考虑这些条件，包括：培养时间，传代次数以及生长培养基的成分等。一般情况，48-72h培养时间下，最初铺板的细胞密度可控制在5×103~5×104/100μl。也可根据细胞大小，增殖速度的快慢来优化最初的细胞铺板密度以及培养时间。
注意：1）最终检测的培养液内含有酚红会严重影响检测结果。推荐MTT检测时细胞培养在无酚红环境下。也可以在进行MTT孵育的时候改用无酚红培养液。2）每次实验都要设置空白对照孔（不含细胞）。对于细胞毒性试验，还要设置未经药物处理的细胞孔，此对照孔的吸光度范围一般控制在0.75-1.25之间；每个样品孔建议做三个平行。
A．实验前试剂准备
1. MTT溶液
用5ml MTT溶剂直接溶解25mg MTT粉末配制成5mg/ml的工作液，用试剂盒内提供的除菌套装以除去溶液中的细菌，该溶液可4℃ 避光短时间保存（越短越好）。建议溶解后，直接将剩余液体小剂量分装放到-20℃保存，避免反复冻融，6个月稳定。
2） 甲臜溶解液（MTT终止液）
甲臜溶解液低温或者常温保存可能会产生沉淀，只需37℃水浴使其充分溶解，混匀后即可使用。
B．MTT细胞增殖检测
1） 接种细胞：用含10%胎牛血清（FBS）的培养液配制成单个细胞悬液，调整细胞密度，以每孔5×103~5×104个细胞接种到96孔板，每孔体积100µl，培养板的边缘孔用无菌PBS，水或者培养液填充。设置空白对照孔（不含有细胞）。
2） 37℃，5% CO2，培养24-72h。
3） 可选：对于贴壁细胞，去除旧的培养液，更换100µl/孔新鲜的培养液（不含酚红）；对于悬浮细胞，离心96孔板，去除尽可能多的上清液。然后加入100µl/孔新鲜的培养液（不含酚红）重悬细胞；
4） 每孔加入10µl MTT工作液（5 mg/ml），加样时尽量勤换枪头，控制加量误差。
5） 水平摇床上低速混匀1 min后，放入37℃培养箱孵育4h。注：对于高密度的细胞（>100,000 cells/孔）可缩短孵育时间至2h。
6） 对于贴壁细胞，直接吸掉旧的培养液，避免枪尖刮破单细胞层。对于悬浮细胞，离心收集细胞，去除培养液。
7） 加入100µl/孔甲臜溶解液，用枪充分混匀后放入37℃培养箱孵育4 h。注：更长的孵育时间会降低检测灵敏度。
8） 孵育结束，放置在酶标仪上摇匀后，选择570nm，测定吸光度。记录结果，比色以空白调零。如果无570nm滤光片，可以使用560-600nm滤光片。
注：对于细胞毒性检测，以未经药物处理细胞的OD值为100%，然后计算药物处理细胞所占的比率（x），公式如下：OD（未处理细胞）/OD（药物处理细胞）=100%/x。然后建立直方图。
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文献和实验[2] Zhong D, Chen W, Xia Z, et al. Aggregation-induced emission luminogens for image-guided surgery in non-human primates. Nat Commun. 2021;12(1):6485. Published 2021 Nov 10. doi:10.1038/s41467-021-26417-2(IF:14.919)
[3] Zhang D, Zhong D, Ouyang J, et al. Microalgae-based oral microcarriers for gut microbiota homeostasis and intestinal protection in cancer radiotherapy. Nat Commun. 2022;13(1):1413. Published 2022 Mar 17. doi:10.1038/s41467-022-28744-4(IF:14.919)
[4] Zhong D, Li W, Hua S, et al. Calcium phosphate engineered photosynthetic microalgae to combat hypoxic-tumor by in-situ modulating hypoxia and cascade radio-phototherapy. Theranostics. 2021;11(8):3580-3594. Published 2021 Jan 22. doi:10.7150/thno.55441(IF:11.556)
[5] Li Y, Chen W, Qi Y, et al. H2 S-Scavenged and Activated Iron Oxide-Hydroxide Nanospindles for MRI-Guided Photothermal Therapy and Ferroptosis in Colon Cancer. Small. 2020;16(37):e2001356. doi:10.1002/smll.202001356(IF:11.459)
MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] assay, first described by Mosmann in 1983, is based on the ability of a mitochondrial dehydrogenase enzyme from viable cells to cleave the tetrazolium rings of the pale yellow MTT
The MTT Cell Proliferation Assay
. The resulting intracellular purple formazan can be solubilized and quantified by spectrophotometric means.The MTT Cell Proliferation Assay measures the cell proliferation rate and conversely, when metabolic events lead to apoptosis or necrosis, the reduction
简介 细胞增殖/细胞毒性测定是涉及培养细胞的研究中最常用的测试之一。 其是检查用于治疗的药物浓度的基本初步测试，也是确定各种研究领域（如肿瘤学和细胞死亡）药物疗效和安全性的非常重要的测试。 传统上，WST-8 或 ATP 检测（使用代谢活性作为指标）和 BrdU 或胸腺嘧啶核苷检测（使用 DNA 合成水平作为指标）已用于细胞生长特性的定量评估。 尽管这些检测由于其简易性和吞吐量而对我们有益，但这些检测都是间接评估方法，因此结果可能与实际细胞数无关。 在许多情况下，这些检测是终点评估，有时会
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