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- Merck
- CB539480
- 2026年01月13日
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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
一年以上
- 英文名：
Proteinase K
- 库存：
现货
- 供应商：
北京智杰方远
- 保存条件：
2℃-8℃
- 规格：
100mg
蛋白酶K (Proteinase K)是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶，它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键，用于蛋白质的常规消化。常用工作浓度为0.05-1mg/ml，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。
推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH 8.0)，10mM CaCl2 。
产品特性
1） 不含RNase和DNase；
2） 在尿素、EDTA和SDS中稳定；
3） 在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性，最佳pH范围为pH7.5-8.0；
4） 最佳反应温度为65℃，但在65℃或更高的温度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。推荐反应温度选择50- 55℃；
5） 来源自Tritirachium album；
6） 活力单位≥30 mAnson-U/mg。
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。产品2℃-8℃保存。
溶解
用无菌50mM Tris-HCl (pH 8.0)，10mM CaCl2溶解，配制成20mg/ml的母液。母液分装保存于-20℃，避免反复冻融。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta（以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
蛋白酶 K，威力巨大的广谱蛋白酶，95C 加热10 分钟，则完全失活。数年前首次使用它，是替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头，效果不错；后来又用于处理 RNase-Free的水，效果也是一级棒。从此就再也不用 DEPC 了。现在将它的细节公开，与大家分享。 配制 RNA 裂解试剂时，直接用灭菌的双蒸水配制，最后，加入蛋白酶 K 至终浓度 1ug/ml。轻轻混匀，室温放置 15 分钟后即可。枪头及离心管去除 RNase：先将枪头及离心管清洗干净后，移入预先混好的含 1ug
编者按： 当我们屏着呼吸使用致癌的DEPC时，是否想过用一种既安全又省钱方法替代DEPC？看过本文，你一定会感慨作者的探索精神。其实，在生物吧，这样的探索还有很多。如果你嫌找得麻烦，那就先看看“牛人强文” 吧！ 蛋白酶 K 的妙用，我曾经在别的论坛发表。坦率地说，蛋白酶 K 的这个用途，是我的得意之作之最。不是因为该发现有什么创新，而是因为它的实用性。当别人还在讨论 DEPC
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