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- 2026年04月21日
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蛋白酶K 是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，从林伯氏白色念球菌(tirtirachium album limber) 中纯化得到，用于生物样品中蛋白质的一般降解。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。
蛋白酶K 是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。在较广的pH 范围内(pH4-12.5) 均有活性，在尿素和SDS 中也较为稳定，还具有降解天然蛋白质的能力。
蛋白酶K 的用途广泛，主要的应用行业包括: 医疗及基础研究领域;基因诊断试剂盒; 基因组DNA 提取试剂盒; RNA 提取试剂盒中取出DNA 和RNA 制备中的核酸酶; 此外，还应用于: 皮革工业(皮革软化及精细化、脱毛和软化、蚕丝脱胶) 制备脉冲电泳的染色体DNA; 提取组织中非蛋白成分时，降解含有蛋白质杂质;食品、酿造工业: 肉类嫩化、酒类澄清;洗涤工业: 酶洗衣粉、洗衣液等也有应用。
规格
100mg普通装或客户定制
比活性值
38 U/mg
蛋白来源种属
酵母菌
分子质量
28,650
贮存和使用
干粉条件下效期为24个月，液态时-20℃保存12个月。客户用缓冲液溶解后，需要-20℃贮存。溶解后，分装成若干份，方便实用，避免反复冻融。如果需要在2℃—8℃环境下放置，超过3天后，建议过滤除菌或加入抑菌剂如0.3%叠氮化纳，防止微生物污染。
稀释缓冲液
根据需要，利用20mM Tris-HCL 缓冲液(pH 7.5)溶解成20mg/ml的工作浓度。
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文献和实验蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta（以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
蛋白酶 K，威力巨大的广谱蛋白酶，95C 加热10 分钟，则完全失活。数年前首次使用它，是替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头，效果不错；后来又用于处理 RNase-Free的水，效果也是一级棒。从此就再也不用 DEPC 了。现在将它的细节公开，与大家分享。 配制 RNA 裂解试剂时，直接用灭菌的双蒸水配制，最后，加入蛋白酶 K 至终浓度 1ug/ml。轻轻混匀，室温放置 15 分钟后即可。枪头及离心管去除 RNase：先将枪头及离心管清洗干净后，移入预先混好的含 1ug
编者按： 当我们屏着呼吸使用致癌的DEPC时，是否想过用一种既安全又省钱方法替代DEPC？看过本文，你一定会感慨作者的探索精神。其实，在生物吧，这样的探索还有很多。如果你嫌找得麻烦，那就先看看“牛人强文” 吧！ 蛋白酶 K 的妙用，我曾经在别的论坛发表。坦率地说，蛋白酶 K 的这个用途，是我的得意之作之最。不是因为该发现有什么创新，而是因为它的实用性。当别人还在讨论 DEPC
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