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- 文献和实验
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- 保质期:
1年
- 库存:
10000
- 供应商:
上海信裕
- 保存条件:
室温保存
产品包装:试剂盒组成 D1800-50 D1800-100 储存条件
RNase A 1ml 2ml -20℃高纯度革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒
蛋白酶K 1ml 2ml -20℃红细胞裂解液 120ml 120ml×2 RT
溶液A 15ml 2 5ml RT溶液B 15ml 25ml RT
漂洗液 15ml 15ml×2 RT洗脱液 15ml 30ml RT
吸附柱 50个 100个 RT收集管 50个 100个 RT说明书 1份 1份 RT
注意事项:高纯度革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒
1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。
2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制备大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增抑制现象。
3、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DN**段较小且提取量也下降。
4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
5、绝大多数哺乳动物的全血如人全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响白细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20ul,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
6、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的 pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效高纯度革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒率。
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文献和实验细菌基因组 DNA提取试剂盒操作指南 (DP302)——细菌
以下操作按照天根产品 DP302 细菌基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。 实验准备: 1. 培养菌液1-5ml (本实验以革兰氏阴性菌为例,革兰氏阳性菌前处理详见说明书) 2. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml 离心管 3. 无水乙醇 4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机 实验准备-试剂盒准备 使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请
,如Buffer PBS等,把微生物从土壤中分离出来,然后再进行DNA的提取。间接法可大大降低土壤中腐殖酸,重金属盐对DNA提取带来的影响,但是这种方法会丢失许多微生物,得到的DNA并非土壤样品中的全基因组(宏基因组),间接法使用的已经很少了。 目前市面上对于去除腐殖质工艺做的最好的试剂盒,就是MPbio公司的土壤DNA提取试剂盒,该试剂盒能够有效去除土壤样本中的腐殖质,极大提高目标DNA的提取浓度,很多土壤相关工作人员都选用该试剂盒。不过优秀的产品也会有短板,MP试剂盒在有效去除腐殖质的过程中难免
的时间和精力,最后因为试剂盒的问题影响实验的进度有点得不偿失,而且脂质体都比较贵。因此,性价比是最重要的因素。大部分的质粒提取试剂盒所得产物可分为如下几个级别:1.高级转染级:这是最高纯度的去内毒素的质粒纯化,主要使用于基因治疗,cell显微注射,原代细胞转染等。2.常规转染级:它要优于2次cscl超速离心纯化的质粒。3.分子生物学级,相当于1次cscl超速离心纯化的质粒。4.测序级:主要用于常规酶切与连接用。我们实验室用过qiagene,axgene,omiga和国产天根的。大家对qiagene
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