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免疫共沉淀(CoIP蛋白与蛋白)
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威奥生物
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Co-IP的原理与免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)大致相似,都由特异抗体与待检样品中相应的特异抗原结合形成抗原一抗体免疫复合物,然后复合物吸附于固化了蛋白A或G的支持物上(蛋白A或G具有吸附抗体的能力),相应的抗原分子也同时被吸附。免疫复合物被吸附到支持物上的过程即为沉淀(Precipitation)。没有被沉淀的
蛋白质随着缓冲液的流洗而被除去。但在免疫共沉淀中,与靶抗原一起被沉淀的还有靶抗原的相互作用蛋白质,
即随着抗体被吸附于固化了蛋白A或G的支持物上,相应的抗原及其相互作用蛋白质也同时被沉淀。最后,采用
相互作用蛋白质的特异抗体经Western Blot检测,以证实二者存在相互作用。
(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;
(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。


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文献和实验xiayuxue 请教大家:我检测的是两种细胞(一种是正常细胞,一种是肿瘤细胞)中某个分子的表达,PCR检测的基因表达量一样多,而蛋白水平却不一样多,有这种可能吗?就是检测的本底表达,未加处理因素 xiayuxue 没有人知道吗? bigbang_0_0 完全有这种可能,mRNA的量的改变不能代表蛋白的量的改变,从mRNA到蛋白,还涉及到翻译和翻译后修饰(包括决定蛋白质稳定性的翻译后修饰
丝状噬菌体的基因与蛋白质丝状噬菌体(filamentousphage)是一类大肠杆菌的噬菌体,细丝状,直径约6nm,长度约1um。用于噬菌体肽库展示的主要是Ff组的M13、f1、fd等噬菌体,这3类噬菌体的亲缘关系十分密切,核酸序列有98%以上的同源性,病毒粒子的大小和结构非常相似,生活周期也相同。这些噬菌体为雄性特异性噬菌体,只能感染有F性因子或F,因子的雄性大肠杆菌菌株,但噬菌体的基因组能够转化无F因子的大肠杆菌。噬菌体基因组为环状单链DNA分子,野生型噬菌体则由6 408个核苷酸组成
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