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免疫共沉淀(CoIP蛋白与蛋白)
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威奥生物
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Co-IP的原理与免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)大致相似,都由特异抗体与待检样品中相应的特异抗原结合形成抗原一抗体免疫复合物,然后复合物吸附于固化了蛋白A或G的支持物上(蛋白A或G具有吸附抗体的能力),相应的抗原分子也同时被吸附。免疫复合物被吸附到支持物上的过程即为沉淀(Precipitation)。没有被沉淀的
蛋白质随着缓冲液的流洗而被除去。但在免疫共沉淀中,与靶抗原一起被沉淀的还有靶抗原的相互作用蛋白质,
即随着抗体被吸附于固化了蛋白A或G的支持物上,相应的抗原及其相互作用蛋白质也同时被沉淀。最后,采用
相互作用蛋白质的特异抗体经Western Blot检测,以证实二者存在相互作用。
(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;
(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。


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