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- 技术资料
- 保质期:
保质期1年
- 英文名:
Western Blot Antibody Stripping Solution
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
4℃保存
- 规格:
100mL
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
| Western Blot Antibody Stripping Solution 蛋白印迹膜再生液 | 36215ES60 | 100ml | 4℃ | 180.00 |
Western Bloting 实验中,在完成了一抗、二抗结合以及后续的化学发光检测等一系列步骤后,可能需要对相同样品中其他蛋白(不同一抗结合)进行检测,或者在相同蛋白(相同一抗)的第一次检测结果不佳从而需要优化检测体系的情况,为了节省工作时间,节省样本使用量,以及消除重新上样可能引起的误差,可通过使用蛋白印迹膜再生液(Western Blot Antibody Stripping Solution)来实现。
本蛋白印迹膜再生液可有效去除PVDF或者NC膜上结合的一抗二抗,同时温和作用维持蛋白的完整性不受影响。本品不含常用的β-巯基乙醇,室温下使用即可,可重复利用膜5次。洗脱后可直接进行封闭等后续的WB步骤。
运输与保存方法
室温运输。4℃保存,一年有效。
使用方法
1)完成WB化学发光检测后,用1×TBS-T(Yeasen,货号:60152ES76)洗膜3次,10min/次。
2)将膜充分浸泡于适量的膜再生液中(至少完全覆盖膜),摇床震荡室温孵育20-30 min,如洗脱效果不佳或者蛋白表达量较高,可延长洗膜时间至30-60min或者更长。
3)用镊子取出膜,用1×TBS-T缓冲液快速淋洗膜一次,之后洗膜5-10min。
4)此时膜上结合的抗体已被去除,重新封闭,进行下一轮抗体孵育。
注意事项
1)本品从低温取出后会出现SDS沉淀,建议温水浴溶解后使用。
2)本品仅适合WB化学发光法检测膜的重复利用;对于生色法底物检测的膜不适合;另外不推荐用于BSA封闭的印迹膜;
3)建议优先检测表达量较低的目的蛋白,用再生液处理后检测表达量高的蛋白;
4)本品重复利用几次后,虽然温和作用蛋白,但是可能引起蛋白信号变弱。所以建议重复使用次数不要超过5次,以确保更好的WB检测效果。
5)本品适用于NC膜和PVDF膜,推荐用于PVDF膜,效果更佳;
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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- 作者
- 内容
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文献和实验[2] Shen Y, Zhou M, Yan J, et al. miR-200b inhibits TNF-α-induced IL-8 secretion and tight junction disruption of intestinal epithelial cells in vitro. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2017;312(2):G123-G132. doi:10.1152/ajpgi.00316.2016(IF:3.468)
根据问题的类型主要分成以下几类: 1. 谨言 以下资料权作参考,请勿盲目模仿 2. 针对样品的常见问题 B. 做线粒体膜UCP2蛋白的Western Blot (以下简写成Western Blot),提取线粒体后冻存(未加蛋白酶抑制剂),用的博士德的一抗,开始还有点痕迹,现在越来
Methods2.1. Material and reagentsDuolbecco’s phosphate buffered saline (PBS), Medium 199 with Earle’s salts and 25mM HEPES, collagenase Type II (from Clostridum histolyticum), antibiotic/antimyotic solutuion (containing 10,000U penicillin, 10,000µg
蛋白印迹(Western Blot) 常用试剂 >>>蛋白抽提 货号 品名 规格 价格 备注 WB003 组织
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