
Taq 酶
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- ZP00101
- 2026年01月07日
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1年
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大量
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上海闪晶分子生物科技有限公司
- 保存条件:
-20度
- 规格:
200u
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用途
Taq酶主要用于对保真性要求不高的PCR扩增和荧光定量PCR,为方便用户对镁离子浓度的调整,所有的buffer都是不含镁离子的,镁离子单独包装。
Taq酶特征
• 克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经三次过柱纯化分离出来的一个约 94 KD 的重组蛋白。
• 具有 5' 到 3‘合成 DNA 的能力;无3 '到 5‘外切酶的活性。
• 具有 5 ' 到 3 ‘外切酶的活性, 特别适合用于荧光定量PCR 。
• 具有 3‘端加 A 的功能,产物经纯化后可直接用于T-A克隆。
• 无外源核酸酶和细菌 DNA 污染。
• SDS - PAGE 检测,纯度> 95% 。
• 最佳延伸温度 72 ℃ ,最佳 Mg 2+ 浓度 1.5mM ,最佳 dNTPS 浓度 0.2mM , 延伸速度为 2000base/min 。
• 10 × PCR buffer: 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 1% TritonX-100 和 15mM MgCl2 。
• Storage buffer: 20mM Tris-HCl (pH 8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50%甘油, 0.5% Nonidet -P40 和 0.5% Tween20 。
Taq酶单位定义
在 74℃ 条件下, 30 分钟内催化 10nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为: 50mM Tris-HCl (pH 9.0 , 25℃ ), 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 200mM dNTP( 含未标记和标记 [3H] dTTP ), 10mg 活化的小牛胸腺 DNA 和 0.1mg/ml BSA, 终反应体积为 50ml 。
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文献和实验plus I Taq plus I是 Taq DNA 聚合酶和pfu DNA聚合酶的混合物。由于pfu 酶具有 3’- 5’外切活性 ,可纠正 PCR 过程中的错误 ,使其错误率为0.03/10e-3 。但同时部分PCR产物也会存在平末端形式 ,而无3’单个dA。在多次连接转化失败的条件下 ,对 PCR产物 3’端先加 A 尾再回收、连接转化 ,取得了很好的效果。 (责任编辑:大汉昆仑王)
for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
酶组织化学酶显示方法 1.偶联偶氮色素法 此法又称偶氮色素法(couplingazo dyemethod),是指用某种人工合成底物在酶作用下产生分解产物,分解产物与重氮盐结合,引起偶联偶氮反应,形成不溶性偶氮色素,以此对酶定位。常用的底物是萘酚系列化合物,如l―萘酚、2―萘酚、6―溴―2―萘酚、萘酚AS、萘酚AS衍生物等。由于重氮盐的种类不同,偶氮色素的颜色也不同,可显示出紫色、蓝色、红色、褐色、棕色和黑色等各种颜色。 重氮盐有不同程度的抑制酶活性作用,因此必须选择抑制作用最弱
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