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- 技术资料
- 保质期:
三年
- 英文名:
Lecithin Tween-80 Nutrient Agar
- 库存:
1000
- 供应商:
广东环凯微生物科技有限公司
- 保存条件:
室温,阴凉干燥处
- 规格:
250g
027020 卵磷脂、吐温80-营养琼脂
(Lecithin Tween-80 Nutrient Agar)
TTC卵磷脂、吐温80-营养琼脂基础
(TTC Lecithin Tween-80 Nutrient Agar Base)
用 途:
卵磷脂、吐温80-营养琼脂用于化妆品细菌总数测定。(化妆品卫生规范微生物检验方法2007版,SN/T 2098-2008)。
原 理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;卵磷脂和吐温80能中和防腐剂,并能起到在乳浊液中分散物质的功能,卵磷脂能中和季铵盐,吐温80可中和酚、六氯酚、福尔马林,两者结合可中和乙醇;琼脂是培养基的凝固剂;大多数细菌能还原TTC,使之形成易于辨别的红色菌落,TTC还能减缓某些细菌的蔓延生长。
【卵磷脂、吐温80-营养琼脂配方(每升)】:
蛋白胨20g
牛肉膏粉3g
氯化钠5g
琼脂 15g
卵磷脂 1g
吐温-807g
最终pH7.3±0.2
【卵磷脂、吐温80-营养琼脂使用方法】:
1、 称取本品51g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌20min。
2、 对样品污染情况的估计,选取合适的样品稀释度,在稀释样品的同时,取1mL稀释液加入到无菌平皿中。
3、 加热溶化琼脂,冷至50℃左右,每200mL培养基加入1支2mL0.5%的无菌TTC溶液(029226)可制成TTC卵磷脂、吐温80-营养琼脂,混匀后迅速将培养基加入到平皿中,每皿约15mL,立即转动平皿,待凝固后,翻转平皿,放入培养箱中于36±1℃培养48h。
4、 观察结果。
质量控制:
质控菌接种后,于36±1℃培养培养48h,结果如下:
卵磷脂、吐温80-营养琼脂:
菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 白色—灰白色
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 良好 黄色
TTC卵磷脂、吐温80-营养琼脂:
菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 白色—灰白色,中心红色
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 良好 菌落黄色,中心红色
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
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文献和实验菌种活化:干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株; 1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株: 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中,划线接种于营养琼脂平板上,36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌:菌落凸起,圆形,不透明; b. 大肠埃希氏菌:菌落稍凸,圆形,湿润,乳白色; c. 铜绿假单胞菌:菌落扁平,圆形,边缘不整齐,光滑湿润,可产生蓝绿或黄绿色素; d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明
。 二、分离纯化 含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pure culture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。 1、倾注平板法 首先把微生物悬液通过一系列稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40~50°左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。单一
水 1000ml pH 7.0 123、尿囊素无机盐培养基 (DSM 6) K2HPO4 0.8g KH2PO4 0.2g MgSO4.7H2O 0.5g CaCl2.2H2O 0.05g FeSO4.7H2O 0.01g MnSO4.H2O 1.0mg 尿囊素(Allantion) 20.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000ml 124、碱性营养琼脂培养基 (DSM 31) 蛋白胨 5.0g 牛肉膏 3.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 1000ml 灭菌后,加入无菌的1M Na
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