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MicroRNA蛋白水平实验
MicroRNA测序
- 技术优势通量高：一次测序得到500万条以上的序列；
- 研究内容
基于Illumina HiSeqTM2000高通量测序技术的小RNA数字化分析，采用边合成边测序的方法，可减少二级结构造成的区域缺失。该技术可以对高质量序列进行序列长度分布的统计及样品间公共序列统计，将筛选后的高质量序列分类注释，从而获得样品中包含的各组分及表达量信息，并对所有小RNA片段进行注释，对新的miRNA则进行靶基因预测。
一、标准信息分析数据产出统计，对原始测序数据去接头污染，去低质量reads； - 18~30 nt 小RNA 测序结果的长度分布；
- 样品间的公共序列和特异序列的分析；
- 小RNA在选定的参考基因组上的分布；
- 小RNA与rRNA、tRNA、snRNA、snoRNA的比对信息；
- 小RNA与重复序列的比对信息；
- 小RNA与外显子或内含子的比对信息；
- 小RNA与miRBase 中指定范围的已知的miRNA的比对；
- 按照优先级将小RNA进行分类注释；
- 利用Mireap 对没有注释的small RNA进行预测，预测新的miRNA，绘制新的miRNA 的二级结构图；
- 已知miRNA的表达谱构建；
- 已知miRNA 的家族分析。
- 二、高级信息分析（基于标准分析）已知miRNA和novel miRNA的靶基因预测；
- 已知miRNA和Novel miRNA靶基因GO注释和KEGG；
- 已知miRNA的碱基编辑分析；
- 已知miRNA 差异分析和聚类分析；
- Novel miRNA 差异分析（2个或2个以上样品）和聚类分析；
- 差异miRNA 靶基因预测；
- 差异miRNA 靶基因GO 注释和KEGG 通路分析。
【本平台合作项目】
分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！
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文献和实验MicroRNA和siRNA克隆的实验方法(protocol)
MicroRNA and siRNA Cloning Protocol (UPDATED July 2005)[MIT] Bartel Lab, MIT this is a protocol about MicroRNA and siRNA Cloning Protocol collect from internet: 下载protocol: http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013
近两年microRNA的研究受到越来越多科学家的关注，大量的实验结果揭示了microRNA在胚胎发育、癌症等方面起到非常重要的调控作用，据推测microRNA可能调控至少30%的基因的表达情况。 如果您也想开展microRNA的研究，该如何下手了？首先你需要知道在你感兴趣的研究领域里到底有哪些miRNA是活跃分子，幸运的话通过阅读发表的文章就能锁定一些miRNA分子，否则需要做一个miRNA表达谱芯片分析来初筛出有研究价值的那些miRNA。表达谱芯片的原理简单的说就是把待测样品中的miRNA
【求助】用带GFP标签的microRNA质粒能用于luciferase实验吗？
dlh110 我构建了个microRNA的带GFP标签的质粒，不知道能不能与目的基因的3’UTR luciferase报告载体共转来检测luciferase的活性？ bigbang_0_0 这个实验还要谨慎考虑一下，GFP的绿色荧光可能会干扰luciferase检测结果。 另外你说的microRNA带GFP标签，你要保证两个东西都要有表达且保持活性，建议你最好把这两个东西构建成两个转录单位，由两个启动
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