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- 合肥博美
- 合肥
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- 2025年12月16日
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12个月
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10000
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合肥博美
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2～8℃
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2×500ml
通用显影定影液套装
Western blot蛋白印迹膜中ECL发光后,显影、定影
注意密闭保存,切勿交叉污染
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文献和实验1、试剂耗材的准备：（1）转膜缓冲液（48 mM Tris-HCl，39 mM 甘氨酸，0.037% SDS，20%甲醇）：（2）10 × 丽春红染液：（3）TBS 缓冲液：（4）TBST 缓冲液（含20%Tween20 的TBS 缓冲液）：（5）封闭液（含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液）：（6）一抗、二抗及抗体稀释液：参照说明书，以封闭液或TBST 进行稀释。（7）底物显色液ECL，4℃ 避光保存，现用现配。（8）显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中，可多次使用。室温避光存放
【求助】求助：Western blotting曝光没有任何条带，也没有背景，为什么？
2、二抗被灭活 想一想操作过程有无上述失误 zhongqiuxie 原因太多。一抗问题可能性更大。另外注意显影机是否很久没换显影定影液了？ yunzh375 我觉得可能是蛋白、发光液的问题吧 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
的PAGlonm室温孵育1h,或37℃孵育30min.（9）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗10min.（10）1%戊二醛洗10min.（11）双蒸水洗5min.（12）1%明胶洗5min.（13）银避光显影8~15min.（14）双蒸水洗15min.（15）固定：用显影定影液（1:4或1:10）固定5min,也可以用15%硫酸钠-20%硫代硫酸钠混合液固定1~3min,或用1%戊二醛固定5min,50℃温水洗3~6min. （16）衬染，核固红衬染3min或甲基绿衬染3min. （17）常规
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