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- 2025年08月20日
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96T/48T
海信裕生物科技有限公司悄悄告诉你：使用ELISA试剂盒要的四个方面。
第一、看似无聊实则重要的洗涤：如果未结合的材料残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。有必要的话，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。
第二、关键的封闭：封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和羊黄体激素(LH)检测试剂盒。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。最常用的非离子型去污剂是Tween-20（恒远生物的吐温-20第二季度的新货已经上市啦，需要的来电咨询哦！）。这种封闭液便宜、稳定，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用，因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度，它会降低特异结合，产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液，后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同，是永久的。它们与开放位点结合并封闭，同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白（BSA）、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过，它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
第三、抗体浓度须优化：如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。
第四、检测试剂要适量：切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高，或者未正确稀释，则会导致高背景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应加入终止液。如果您的羊黄体激素(LH)检测试剂盒不幸地遇到了高背景，那么也无需太担心，依次查看ELISA系统中的组分，并排除可能存在的问题。悉心优化，相信很快就会有漂亮的结果。
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文献和实验犬 促黄体激素（LH） 酶联免疫 分析 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定犬血清，血浆及相关液体样本中 促黄体激素（LH） 的含量。 实验原理 ： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 犬 促 黄体激素（LH） 水 平。用纯化的 犬 促 黄体激素（LH） 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 促 黄体激素（LH） ，再与HRP 标记的 促 黄体激素（LH） 抗体
指促黄体激素（ LH）的分泌的变动。具有性周期的动物在非妊娠的状态下，周期地反复排卵，血液中的 LH水平也有周期地显著变化。在排卵的 8-12 小时前猛增（为基值的 5-20倍），经过短时间后再猛减。把这种 LH的分泌情况可喻为一进一退的浪潮（ surge），故称为 LH浪潮。如兔等因交配刺激而排卵的动物，在交配后形成 LH浪潮。
促黄体〔生成〕激素释放因子 LH-releasingfactor
简称 LRF， LH-RF。亦称 LRH或 LH-RH（ LH-releasing hormone）是在下丘脑的神经分泌细胞中合成，在正中隆起部，从轴索末端向脑垂体门静脉系统的第一毛细血管丛的血管中释放，当被运到腺垂体时可直接作用于促黄体激素（ LH）分泌细胞，促进 LH释放。猪的 LRF是具有如下的结构的十肽。 （ pyro） Glu-His-Tyr-Ser-Tyr-Gly- Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 1971年 A．
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