intype IC-RNA (1ml)

酵母RNA的提制

）；0.024 为1mL 溶液含有1μg RNA 的光密度值。 五、结果计算 根据含量测定的结果按下式计算提取率： 六、思考题 1．RNA 提制中注意事项是什么？ 参考答案 1．主要注意事项为：避开 核酸酶 作用的温度范围20～70℃，防止RNA 降解。同时在调pH 值时，一定要缓慢小心，且要在低温下进行。此外，在抽滤洗涤时，要用乙醇洗涤，且不可用水洗，否则将导致

RNA甲醛变性胶电泳

提取样品的总RNA后，一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量。由于RNA容易形成二级结构，因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳，得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。一、试剂：DEPC（Sigma公司产品），MOPs（Bocherigmer公司产品），甲酰胺（Formamide，Sigma公司产品），溴酚蓝（Bromphenol Blue，Sigma公司产品）。EDTA-Na2，氢氧化钠，醋酸钠，甲醛，甘油，分析纯，国产。二、试剂配制：1、DEPC 水的处理：用量筒量取去离子水2L

RNA-FISH不难，和小助手一起拨开云雾见月明

1min； （4）每孔加入1ml预冷的通透液，置于4度冰箱，5min； （5）弃去通透液； （6）1X PBS洗细胞，3次，每次加入1ml。 3、检测细胞或组织中的RNA （1）用钻石笔在切片背面圈定用于原位杂交的范围； （2）杂交前，先将切片置于约200ul预杂交液中封闭，20-25度，20min； （3）同时，将杂交液预热于同上温度中； （4）在探针混合液稀释好待用前，不要将预杂交液从切片上弃去； （5）切片需置于湿盒中； （6）杂交1小时，所用温度与预杂交温度相同，每张切片