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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
39
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1mL
操作流程:
1.单细胞裂解液 (RNA)1mL说明书根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
详细介绍:

以下是单细胞裂解液 (RNA)1mL说明书的相关产品:
78-5000 pg/mL 人Janus激酶3(JAK3)ELISA试剂盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Fibroblast growth factor 23
0.78-50 ng/mL 人Ras相关蛋白(RAB14) ELISA试剂盒
0.156-10 ng/mL 人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA试剂盒
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78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Transcription termination factor 2
单细胞裂解液 (RNA)1mL说明书外消旋马来酸噻吗洛尔 rac Timolol Maleate 57073-55-9 质量规格:美国进口
特女贞苷 CAS 39011-92-2 规格: HPLC≥98%;20mg/vial 订购|咨询
(R)-(+)-马来酸噻吗洛尔 (R)-(+)-Timolol Maleate 33305-95-2 质量规格:美国进口
3,4-二羟基苯甲醛 CAS 139-85-5 规格: HPLC≥98%,20mg/vial 订购|咨询
(S)-(-)-马来酸噻吗洛尔 (S)-(-)-Timolol Maleate 50929-98-1 质量规格:美国进口
川芎嗪 CAS 76494-51-4 规格: 20mg 订购|咨询
替硝唑标记d4 Tinidazole Labeled d4 19387-91-8 (unlabeled) 质量规格:美国进口
羟基红花黄色素A CAS 146087-19-6 规格: 20mg 订购|咨询
妥布霉素A Tobramycin A 20744-51-8 质量规格:美国进口
汉黄芩素 CAS 632-85-9 规格: 20mg 订购|咨询
生物素基妥布霉素酰胺 Biotinyl Tobramycin Amide 419573-18-5 质量规格:美国进口
芒果苷 CAS 4773-96-0 规格: 20mg 订购|咨询
实验要点 :
1.单细胞裂解液 (RNA)1mL说明书CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。非冻型组织RNA保存液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
储存事项:
A. 在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
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文献和实验流程如下: 基于 TCR/BCR 检测的 V(D)J 区域靠近 5' 端,故免疫组库测序所用磁珠标签序列由也单细胞最末端的 polydT 序列改为 TSO 序列,构成 read1+barcode+UMI+TSO 的标签组成,用于单细胞的捕获识别和后续 5' 端 RNA 的抓取捕获。 如图, 凝胶珠上的序列中,barcode 序列用于标记细胞,UMI 序列用于标记转录本,而 TSO (template switch oligo) 用于 5’ 端捕获。 当磁珠与细胞结合并在油包水环境中反转
单细胞测序在疾病诊断和细胞异质性研究中发挥着重要作用。然而目前的单细胞测序手段需要将细胞消化并裂解才能够进行,而细胞状态在这一操作中不可避免的会发生改变,因此很难掌握细胞真实的基因表达情况,尤其对于基因通路上表达变化的检测为不利。近期苏伊士理工大学使用FluidFM创建了一种原位活细胞基因测序方法,这种方法能够在不杀死细胞的情况下完成对细胞的测序工作。通过这种技术该团队成功完成单细胞RNA基因测序,并通过这种方法检测到了细胞的基因表达和细胞周期状态变化。下面本文就这项工作的具体内容进行阐述
单细胞测序悬液老是制备失败?别担心,单细胞核测序来拯救你的样本了
越多的被应用到各种研究中。 这篇文章对17名死于COVID-19的人进行临床解剖时收集了11个器官的组织,形成了一个约有420个标本的组织库。通过对肺、肾、肝和心脏等组织的单细胞测序(sc-RNA-seq)和单细胞核测序(snRNA-Seq),得到了SARS-CoV-2感染后不同组织全面的单细胞图谱;可见单细胞核测序已经被运用于各种不同的组织类型。 目前吉凯已经积累了各种不同类型样本的单细胞核测序(snRNA-seq)经验,并且在单细胞核抽提方面也是一如既往的发挥了吉凯强大且专业的单细胞
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