Sephadex G-25 葡聚糖凝胶G-25

葡聚糖凝胶G-25 Pharmacia

品牌：Solarbio
货号：S8140
英文名称 : Sephadex G-25 medium
储存条件 : 室温
外观（性状） : 白色颗粒
单位 : 瓶



说明：分离试剂，层析介质。分离范围：1000-5000


葡聚糖凝胶使用说明 ：

化学和物理性质
葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。 G 型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。 葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。 葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程，可在较低的压力下获得较高的流速。 另外，粗级也可用于批量工艺。

化学稳定性:
葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。 它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的，在强酸中凝胶骨架的糖昔键被水解。 长期接触氧化剂将破坏凝胶，因而应避免使用。 物理稳定性 物理稳定性 物理稳定性 物理稳定性: :: :
葡聚糖疑胶并不熔融，可以在湿态、中性PH 进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。 干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。 葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。

产品名称 分离范围 应用
葡聚糖凝胶G-10 <700 缓冲液交换、脱盐，分离小分子，去除小分子
葡聚糖凝胶G-15 <1500 缓冲液交换、脱盐，分离小分子，去除小分子
葡聚糖凝胶G-25 1000-5000 工业上脱盐及交换缓冲液
葡聚糖凝胶G-50 1000-30000 多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定
葡聚糖凝胶G-75 2000-70000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶G-100 2000-120000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶G-150 5000-300000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定
葡聚糖凝胶G-200 5000-600000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定


使用方法 :

1. 葡聚糖凝胶预处理：
在室温下，将葡聚糖凝胶干粉浸泡于蒸馏水中至少 24 小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，或者用蒸馏水煮沸至少1小时直至充分溶胀，凝胶体积不再变化。

注：在溶胀前，加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降，沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒较多，
需要重复多次漂洗将其除去，防止层析时阻塞凝胶柱，影响流速。

2. 装柱：
将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层; 装柱要均匀，可在凝胶耐受的操作压下装柱，装好的凝胶柱可以检测柱效，检测过滤柱装填是否合格。 凝胶层析分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度：分级分离时，一般需要 100cm 左右长的层析柱，柱高与直径之比为 20:1-100:1，柱高过高时，凝胶挤压变形阻塞会引起较大的反压，应当尽可能避免；分组分离（例如脱盐）时用短柱，柱高控制在40-50cm 以下，柱高与直径的比约
为 5:1-10:1。


3. 平衡：
上样前用平衡液平衡层析柱至少 3-5 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止（例如流出液的 PH 值等于上柱的Buffer的PH值）；

4. 上样：
分级分离时上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积。 样品溶液如有杂质或沉淀应过滤或离心除去，样品的粘度不能过高，否则影响分离效果。

5. 洗脱方法:
可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱；在上柱缓冲液中加入 NaCl 等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化；

6. 在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。 方法是以40cm/h用1M氢yang化钠反向清洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

7. 保存
凝胶柱暂时不用，可将其回收，一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干，可加入0.02%叠dan化钠防腐或用20%乙醇浸泡，以控制微生物生长。

备注:
其它规格葡聚糖凝胶处理方法类似。
葡聚糖凝胶G-10 膨胀系数为2-3倍，有效期为1年；
葡聚糖凝胶G-15 膨胀系数为2.5-3.8倍，有效期为1年；
葡聚糖凝胶G-25 膨胀系数为4-6倍，有效期为1年；
葡聚糖凝胶G-50 膨胀系数为8-10倍，有效期为6个月；
葡聚糖凝胶G-75 膨胀系数为10-12倍，有效期为3个月；
葡聚糖凝胶G-100 膨胀系数为12-15倍，有效期为2个月；
葡聚糖凝胶G-150 膨胀系数为14-16倍，有效期为2个月；
葡聚糖凝胶G-200 膨胀系数为15-18倍，有效期为2个月。