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- 技术资料
- 保存条件:
保存在常温(RT),1年。
- 保质期:
保存在常温(RT),1年。
- 英文名:
DNA Extraction Kit
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 规格:
50T/100T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥170.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥300.00 |
本试剂盒采用可以高效、专一结合的DNA硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100bp-10kb大小的片段,回收率大于80%(小于100bp和大于10kb的DNA片段回收率为30-50%)。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。
注意事项:在使用本试剂盒前请阅读此注意事项。
1.电泳前最好更换成新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2.如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
3.切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
4.回收小于100bp和大于10kb的DNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
5.回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
6.如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤(仅供参考):
*使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。
1.琼脂糖凝胶电泳后,将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入干净的离心管中,称取重量。
2.向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100μL,则加入300μL溶胶液),50-55℃水浴放置10min,期间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
注意:溶胶时,如果溶胶液变为红色(正常情况下为淡黄色),可向含有DNA的胶溶液中加入10-30μL3M醋酸钠(pH5.2)将胶溶液调为淡黄色,否则将会影响DNA与吸附柱的结合,影响回收效率。
3.将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm离心30-60s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
注意:胶块完全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。
4.向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
5.向吸附柱中加入600μL漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
6.12000rpm离心2min,尽量除去漂洗液。将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,防止漂洗液中的乙醇影响后续的实验。
7.将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加适量经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置2min,12000rpm离心1min。
注意:
1)为了增加回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,12000rpm再次离心1min。
2)洗脱缓冲液体积不应少于30μL,体积过小影响回收效率。
3)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
8.DNA产物-20℃保存。

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文献和实验江janice 求助:用的是天根 的胶回收试剂盒,11管PCR产物,差不多500微升的总体积,上四个孔电泳,电泳后用天根的盒子回收到四个EP管,每管40微升,取5微升电泳,居然没有成功,又取10微升电泳还是没有任何条带,不知道可否有人用天根的盒子,是否遇到这方面的问题,一般100微升的PCR产物,回收到多少体积比较恰当,纠结啊,回收了好几次电泳都没有目的条带,盒子是刚买的新盒子,谢谢好心人帮助 大鹏鸟 天根的盒子还是很好
产品 普通琼脂糖凝胶回收试剂盒 AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒 小量胶回收试剂盒 琼脂糖凝胶回收试剂盒 回收片段大小 100bp-10kb 75bp-10kb 50bp-20kb
国产产品的对比,当然,参数是厂家提供的,标准有差别的。 品牌 天根(天为时代) 杭州 维特洁(已被Axygen收购)深圳天地人Omega产品普通琼脂糖凝胶回收试剂盒AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒小量胶回收试剂盒琼脂糖凝胶回收试剂盒回收片段大小100bp-10kb75bp-10kb50bp-20kb回收率>80%(100 bp的DNA片段回收率为50 %以上)60�85%(根据长度不同)85%产品描述可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲









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