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见说明书
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100
- 供应商:
上海远慕生物
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室温,过滤除菌,36个月
- 规格:
100ml
上海远慕生物科技有限公司生产的: β-琼脂糖酶缓冲液(10×) 主要用于:缓冲液 产品组成及特殊说明:主要由Tris、EDTA组成。
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文献和实验限制性内切酶的作用特点以及使用方法。掌握 DNA 琼脂糖凝胶电泳的操作与 DNA 片段的回收。【实验原理】目的 DNA 被限制性核酸内切酶水解后产生大小不同的 DNA 片段,这些 DNA 片段在一定浓度的琼脂糖凝胶电泳上可以按分子大小不同而分开,并可以用不同的方法再把这些 DNA 片段从琼脂糖凝胶上回收回来。限制性核酸内切酶水解 DNA 的活性与酶的单位数,缓冲液的离子强度和反应温度有关。【实验试剂与器材】限制性内切酶10×内切酶缓冲液琼脂糖(一)DNA 分子的酶切消化【实验方法与步骤】DNA
了核酸片段的迁移 凝胶(图 7)。因此,实验的电泳步骤可“抓拍”到样品中结合型和游离型 DNA 的平衡情况。对于 EMSA,应在凝胶制备和电泳中使用低离子强度缓冲液,以帮助在电泳过程中稳定核酸 - 蛋白质复合物。 图 7.电泳迁移率实验。 2.用于纯化核酸样品的制备型电泳 核酸凝胶电泳的制备型应用,指的是在电泳分析后从凝胶基质中纯化、提取分离的核酸。因此,此种用于凝胶纯化的电泳通常用作下游应用的制备步骤。此外,凝胶制备方法可与分析方法联合使用。 a. 制备型电泳的相关应用 制备型电泳常用于多种
7 DNA 聚合酶以及末端转移酶。为满足工作需要,还开发有 Klenow DNA 聚合酶,耐热 DNA 聚合酶以及反转录酶。除限制修饰酶和聚合酶以外,基因操作中还用到很多重要的酶,包括:连接酶、T4 多核苷酸激酶、碱性磷酸酶、核酸酶、琼脂糖酶、蛋白酶、溶菌酶以及一些 DNA 结合蛋白。限制性核酸内切:能在特异位点(酶切位点)上催化双链DNA分子的断裂,产生相应的限制性DNA片段。 存在于细菌体内。 切割不同来源的DNA分子将产生特征性限制性酶切图谱,具有重大应用价值(“分子手术
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