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100
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上海远慕生物
- 英文名:
无
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0.1mg/1mg/5mg
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文献和实验的说明书,按照适当比例稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。 二抗需根据一抗进行选择,例如,一抗是小鼠来源的IgG,则二抗需选择抗小鼠IgG的二抗,如辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)。 7. 蛋白检测(Detection of proteins): 参考相关说明书,使用ECL类试剂来检测蛋白。 压片可以采用专用的压片暗盒进行。 洗片时可以使用X光片自动洗片机。如果没有自动洗片机,可以用显影定影试剂盒自行配制显影液和定影液进行手工
成纤维细胞生长因子)、EGF(表皮生长因子)均购自Gibco公司 。抗体为:Nestin兔抗鼠多克隆抗体(博士德公司),GFAP单克隆抗体(Sigma公司),β-Ⅲ tubulin 单克隆抗体(Sigma公司),生物素标记山羊抗小鼠IgG(北京中杉生物试剂公司),山羊抗兔Cy3-IgG(博士德公司),DAB(北京中杉生物试剂公司) ,胎牛血清(FBS,杭州四季青生物试剂公司)。仪器:CO2培养箱(Thermo,美国) ,荧光倒置相差显微镜(Olympus IX70,日本)。病毒载体:Ad/EGFP,滴度为2×1011
,则二抗需选择抗小鼠IgG的二抗,如辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)(A0216)。碧云天有多种二抗提供。 Ø 用微型台式真空泵或滴管等吸尽洗涤液,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。 Ø 回收二抗。加入Western洗涤液(P0023C),在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液洗涤5-10分钟。 共洗涤3次。如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数
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