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- 2025年11月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 供应商：
南京森贝伽生物科技有限公司
- 检测范围：
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- 检测方法：
酶联免疫法
- 应用：
科研实验
- 标记物：
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- 样本：
血清，血浆及相关液体
- 规格：
96T/48T
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文献和实验大家都知道,做MSP亚硫酸盐处理后,需进行纯化,我用的PROMEGE的DNA cleanup试剂盒,按它推荐的方法,每1ugDNA需纯化树脂1ml,而经过我查的文献和反复实验发现,1-2ugDNA用100ul树脂就够了,当然不再是按它的步骤,现将我的步骤公布如下,希望对大家有所帮助: 1. Take 1 -2 ug of DNA and add double-distilled water to 50 mL in a 1.5-mL tube. 2. Add 3.5 uL of 3 M
进入丁香园，是从做MSP开始的。从对DNA甲基化的一无所知到MSP实验成功，经历了很多艰难，同时也收获得了不少经验。从丁香园的帖子可以看出，近几年来，国内对DNA甲基化的研究在逐年增加，战友们在实验中遇到的困难也不少。在这里谈一下对MSP,及BSP的一点体会，希望能对新手们有所帮助，也请老手们批评补充。 亚硫酸氢盐转化和PCR扩增是MSP,BSP的两个基本步骤。亚硫酸氢盐转化，估计现在做手工修饰的也不多了，试剂盒能够很方便的帮我们解决问题。但PCR中的引物设计，现在可能还是个难题。看到
设计引物后，确定BSP反应条件。我们实验室一般都做45个cycle.提个有意思的题外话，通常BSP的退货温度，会比相应的MSP的退货温度低。 2. BSPCR后，取10ul跑PCR，如条带单一，则直接克隆，具体操作按照Invitrogen的TOPO试剂盒进行；如条带有杂带，需要进行PCR Screen，具体操作及原理以后再讲； 3. 克隆后在LB胶上，培养过夜后，后通常取8-12个克隆，LB培养过夜； 4. 过夜后LB液浑浊
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