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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1380.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1960.0 |
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文献和实验大家都知道,做MSP亚硫酸盐处理后,需进行纯化,我用的PROMEGE的DNA cleanup试剂盒,按它推荐的方法,每1ugDNA需纯化树脂1ml,而经过我查的文献和反复实验发现,1-2ugDNA用100ul树脂就够了,当然不再是按它的步骤,现将我的步骤公布如下,希望对大家有所帮助: 1. Take 1 -2 ug of DNA and add double-distilled water to 50 mL in a 1.5-mL tube. 2. Add 3.5 uL of 3 M
进入丁香园,是从做MSP开始的。从对DNA甲基化的一无所知到MSP实验成功,经历了很多艰难,同时也收获得了不少经验。从丁香园的帖子可以看出,近几年来,国内对DNA甲基化的研究在逐年增加,战友们在实验中遇到的困难也不少。在这里谈一下对MSP,及BSP的一点体会,希望能对新手们有所帮助,也请老手们批评补充。 亚硫酸氢盐转化和PCR扩增是MSP,BSP的两个基本步骤。亚硫酸氢盐转化,估计现在做手工修饰的也不多了,试剂盒能够很方便的帮我们解决问题。但PCR中的引物设计,现在可能还是个难题。看到
设计引物后,确定BSP反应条件。我们实验室一般都做45个cycle.提个有意思的题外话,通常BSP的退货温度,会比相应的MSP的退货温度低。 2. BSPCR后,取10ul跑PCR,如条带单一,则直接克隆,具体操作按照Invitrogen的TOPO试剂盒进行;如条带有杂带,需要进行PCR Screen,具体操作及原理以后再讲; 3. 克隆后在LB胶上,培养过夜后,后通常取8-12个克隆,LB培养过夜; 4. 过夜后LB液浑浊
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