豚鼠血清（无菌过滤）

补体C4溶血覆盖技术

电泳是通过电场作用将C4迁移率不同的同种异型分离开，然后依照分型标准定型。在某些情况下，C4A某种同种异型与C4B某种同种异型迁移率相同不易区分开，此时可用溶血覆盖技术加以区别。 1、原理 用肼处理豚鼠血清，可灭活其补体成分C4，使之成为帜缺乏的血清。将C4缺乏的豚鼠血清与致敏的SRBC混合，因缺乏C4，补体的攻膜效应不能发挥，将混合物与一定浓度琼脂糖混合倾注在电泳完毕的凝胶板上，凝胶板上C4区带使混合物中的C4成分得以补偿，溶血反应发生，凝胶板上C4条带区可出现透明溶血带。C4B的溶血

抗补体实验检测与补体结合的CIC

血清中有免疫复合物存在时，可与其本身的C1（内源性C1）结合。将被检血清56℃加热1h，能破坏结合的C1，空出补体结合位点。当加入豚鼠血清（外源性C1）及指示系统（致敏SRBC）时，CIC又可与外源性C1结合，使致敏SRBC的溶血被抑制。1、试剂（1）缓冲生理盐水 NaCl l7.00g，NaaHP04 1.13g，KH2P04 0.27g，蒸馏水溶解至100ml。用时取此液5mL，加蒸馏水95ml，10%硫酸镁0.1ml当日使用；（2）溶血素 按效价以缓冲盐水稀释至2单位；（3）2%SRBC

补体C4溶血活性的测定（试管法）

将豚鼠血清用水合肼或氨水处理去除其中的C4，这种C4缺乏血清（简称R4）不能使致敏的SRBC溶解，当加入含有C4的受检血清后，级联酶促反应发生即可导致致敏的SRBC溶解。溶血的程度与待测血清中C4的活性相关。1、无补体C4-抗原抗体复合物（EAR4）的制备 在新鲜豚鼠血清中按每ml加0.15mol/L氨水0.25ml或0.75mol/L水合肼0.25ml，混合后置37℃水浴30～90min，灭活其中的C4。用1mol/LHCl调节至pH7.2备用，取5%SRBC悬液与等体积4U溶血素混合