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- 英文名:
RNA Polymerase, SP6
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- 供应商:
嵘崴达
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−20°C
- 规格:
5000 UNITS
SP6 RNA聚合酶
from Escherichia coli BL 21/pSR3
别名:
mRNA, polymerase
一般描述
利用该系统能够获得均匀标记的单链RNA。转录物可以用生物素或DIG-11-UTP标记,或者使用[α-32P]或[α-35S]标记的核苷酸进行放射性标记,以获得高比活性。
内容物:
- SP6 RNA聚合酶,≥20 U/μl,溶于缓冲液,pH 7.9
- 转录缓冲液,10倍浓缩
特异性
启动子特异性
SP6 RNA聚合酶具有极强的启动子特异性,仅转录噬菌体SP6 DNA或SP6启动子下游的克隆DNA(例如pSPTBM20;pSPTBM21)。
热灭活:通过加入 2 μl 0.2 M EDTA(pH 8.0)和/或加热至65℃来终止反应。
应用
SP6 RNA聚合酶能够以转录SP6启动子下游的克隆DNA为模板,转录合成相应的RNA。可以用标记的NTP进行合成,获得高度标记的RNA。合成的RNA可用于许多应用,包括:
- RNA或DNA印迹技术
- 原位 杂交
- RNA酶保护研究:由酶合成的转录物可用作前体RNA,以研究RNA剪接和加工。
- 在转录反应期间,通过在GTP或ATP上过量添加m7GpppG或m7GpppA而在 体外 合成加帽RNA。将得到的反义RNA引入细胞,可抑制相应基因的表达。
- 合成反义RNA探针
| 11487671001 | RNA Polymerase, SP6, 5000 uRNA聚合酶 | 5,000 U |
| 11573179910 | DIG-11-dUTP,Alkali-labil, Sol | 125 nmol (125 µl) |
| 10633542001 | Polynucleotide Kinase, 1000 U多核苷酸激酶 | 1,000 U |
| 11209299001 | Nylon Membranes, 20 sheets 尼龙膜 | 20 sheets (10 x 15 cm) |
| 11585614910 | DIG High Prime Lab./Det.Kit II | 1 kit (12 labeling reactions and 24 detection reactions) |
| 10716359001 | DNA Ligase, T4, 500 units (1U/DNA连接酶 | 500 U (1 U/µl) |
| 10799009001 | DNA Ligase, T4, 500 units (5U/ DNA连接酶 | 500 U (5 U/µl) |
| 10713023001 | Phosphatase,alkaline(AP),MB Gr 碱性磷酸酶 | 1,000 U (1 U/µl) |
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文献和实验一般是指 DNA依存性 RNA聚合酶。是催化以 DNA为模板( template)、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成 RNA的酶。因为在细胞内与基因 DNA的遗传信息转录为 RNA有关,所以也称转录酶。反应以下式示: n1 -n4 表示各个模板的 DNA链的胸腺嘧啶、胞嘧啶、鸟嘧啶、腺嘌呤的碱基数。通过特异的碱基配对的形成,合成具有与模板 DNA链完全互补的碱基排列的 RNA。反应是由( 1) DNA与酶的结合
相关专题 重组DNA技术工具酶 RNA聚合酶(RNA polymerase):以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。 催化转录的RNA聚合酶是一种由多个蛋白亚基组成的复合酶。如大肠杆菌的 RNA聚合酶有五个亚基组成,其分子 量为480000,含有α,β,β’,δ等4种不同的多肽,其中α为两个分子,所以全酶(holoenzyme
合成是以DNA的一条链为模板而进行的,所以这种转录方式又叫做不对称转录。②都以四种三磷酸核苷的底物,原料;③都遵循DNA与RNA之间的碱基配对原由,A=U,T=A,C=G,合成与模板DNA序列互补的RNA链。④RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成。⑤需要Mg2+或Mn2+离子。⑥并不需要引物。RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性,所以没有校正功能。 RNA聚合酶催化下列反应: 大肠杆菌RNA聚合酶的研究得比较透彻的,这是一个分子量达50多万,全酶由五咱亚基组成,去掉δ
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