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- roche
- 3353575910
- 2026年03月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
见产品外包装
- 英文名：
DIG Oligo 3'-End Lab
- 库存：
需确认
- 供应商：
嵘崴达
- CAS号：
见产品外包装
- 保存条件：
dry ice
- 规格：
25 REACTIONS
DIG寡核苷酸3′-末端标记试剂盒，第2代
sufficient for 25 labeling reactions (100 pmol of oligonucleotides per assay; 1 ug of a 30-mer oligonucleotide), storage condition avoid repeated freeze/thaw cycles
一般描述
我们致力于为您提供更环保的替代产品，以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品为一种安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案，可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性，因此，使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
第二代寡核苷酸3′末端di高辛标记试剂盒使用了末端转移酶，可将单个di高辛标记双脱氧尿苷三磷酸(ddUTP)催化添加到寡核苷酸的3′-OH端上，从而标记寡核苷酸。
应用
第二代寡核苷酸3′末端di高辛标记试剂盒采用DIG-11-ddUTP和重组末端转移酶对14-100bp的寡核苷酸进行3′-末端标记。
DIG标记寡核苷酸已用于多种杂交技术：
- 斑点/狭缝印迹
- 菌落/斑块杂交
- Southern印迹/Northern印迹
- 原位杂交
特点和优势
- 由于寡核苷酸具有小分子量，可用于快速杂交动力学
- 单链探针，在杂交过程中不会复性
- 可以根据实验设计序列
- 特别适用于原位杂交；由于寡核苷酸具有小分子量，因此易于扩散到固定的组织和细胞中
包装
1个试剂盒包含9个组分。
质量
已通过斑点杂交试验测试功能。
原理
利用重组末端转移酶将一个DIG-ddUTP分子添加到寡核苷酸的3′-末端。这能够确保获得具有高特异性和独特性的杂交信号，该信号可利用酶联免疫测定结合抗DIG-AP抗体偶联物以及一种有色或化学发光反应进行检测。
制备说明
活化剂：硫酸钠，Tris
工作浓度：寡核苷酸：100 pmol
在一次标准标记反应中，最多能够标记100pmol（一个30聚体为1 μg）寡核苷酸。
测定时间：从标记寡核苷酸到杂交和检测到第一个可见信号的完整过程，可在24小时内完成。
样品材料
长度为14至100个核苷酸的寡核苷酸，经过HPLC或凝胶电泳纯化
储存及稳定性
-15–-25 °C储存。（未开封试剂盒）
| 3353575910 | DIG Oligo 3'-End Lab. Kit,2nd | 1 kit (25 labeling reactions) |
| 10481238001 | pBR322 DNA (1 A260 unit) | 200 µl (1 A260 unit) |
| 11388908910 | Biotin-16-UTP | 250 nmol (25 µl) |
| 11745816910 | DIG-Nick translat.mix f.in sit | 160 µl (for 40 labeling reactions) |
| 11093274910 | Anti-digoxigenin AP-conjungate | 150 U (200 µl) |
| 10885819001 | pUC18 DNA | 50 µg (200 µl) |
| 11004760001 | Random Primed DNA Labeling Kit DNA标记试剂盒 | 1 kit (50 labeling reactions) |
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文献和实验-11–dUTP加于其3’-OH端（脱去一个焦磷酸）。 4．酶标DNA 标记试剂是辣根过氧化酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）。通过对苯醌（PBQ）与聚乙烯亚胺（PEI）连接而成（HRP-PBQ-PEI ），此试剂在戊二醛的作用下与变性的DNA结合，使HRP与DNA连接在一起，组成HRP标记的DNA探针。 5．酶标寡核苷酸 包括核苷酸5’末端标记HRP法和内部标记AP法。前者是在HRP中产生一个-HS反应基团，在寡核苷酸合成终了加在5’端，带一个C6的-HS基
公司的Atlas Pure Total RNA Labeling System： 这是一个从Total RNA中制备同位素标记的cDNA探针的试剂盒。利用生物素偶联的Oligo（dT）和磁珠偶联的Streptavidin将mRNA吸附到磁珠上，加入MacroArray（包括尼龙膜基质和塑料基质）提供的基因特异引物混合物（CDS Primer）、同位素标记物和逆转录酶，直接在磁珠上合成同位素标记的cDNA探针，最后从磁珠上洗脱标记好的探针，纯化后即可用于杂交。这个标记试剂盒可以从少至10μg
MacroArray（包括尼龙膜基质和塑料基质）提供的基因特异引物混合物（CDS Primer）、同位素标记物和逆转录酶，直接在磁珠上合成同位素标记的cDNA探针，最后从磁珠上洗脱标记好的探针，纯化后即可用于杂交。这个标记试剂盒可以从少至10μg的total RNA中制备适用于Clontech公司各种尼龙膜基质和塑料基质MacroArray的高质量cDNA探针。由于将mRNA纯化和cDNA探针合成、标记合为一体，方便用户的同时还可节约成本。这个系统不适用于玻片芯片的探针标记。 4） Clontech公司
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