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Plasmid
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北诺生命科学
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下面所有质粒和菌株,均为本公司实验室亲自验证过,可以提供技术支持,载体来源于promega,addgene,clontech,novagen,invitrogen可提供质粒图谱,可提供近万种质粒载体、菌株、基因和细胞株,并可提供实验技术外包服务,如基因克隆、质粒构建、蛋白原核、真核表达及纯,pQE 载体,原核表达载体,克隆载体 ,毕赤酵母表达载体,毕赤酵母宿主菌,酿酒酵母表达载体 ,酿酒酵母宿主菌,真菌表达载体,真核哺乳动物荧光载体,真核哺乳动物载体,植物表达载体,大肠杆菌宿主菌,枯草宿主菌
酿酒酵母表达载体
pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF,pY15TEF,pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187,酿酒酵母AH109;质粒pGADT7,pGBKT7;对照质粒pGBKT7-53,pGBKT7-lam,pGADT7-T,PCL1,酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190, 毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc,配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33,KM71,KM71H,GS115,
原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列,pET-GST,pGEX系列(含GST标签),pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列,pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列,pBV220,221,222,pTXB系列,pLLP-ompA,pIN-III-ompA(分泌型表达系列),pQBI63(原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF(+), pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk 233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK(+),pBlueScript SK(-) pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒: pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒:pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1,pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣: pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞: DH5a JM101 JM103 JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21(DE3) HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21(AI) BL21(DE3)plysS TG1 TB1 DH5a(pir) Tuner(DE3) Bl21 codonplusRIPL Novablue(DE3) Rosetta Rosetta(DE3) Rosetta(DE3)plys Rosetta-gami(DE3) Rosetta-gamiB(DE3), Rosetta-gamiB(DE3)plysS Orgami(DE3) OrgamiB(DE3) HMS174(DE3)
植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301, pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIA super1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2, T-DNA插入载体(随机突变体库)pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1
枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43, pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK, pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641, pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01, 配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700, WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33
RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0,pSilencer 2.1-U6 hygro, pSilencer 3.1-H1 hygro,pSilencer 3.1-H1 neo, pSilencer 4.1-CMV neo, pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体(oligoengine) pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体(clontech): RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen(Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide) RNAi慢病毒载体(addgene): pLKO.1 pET载体
3a, 3d
3c-sumo
5b
11a A+
12a A+
15b A+
16b A+
17b A+
19b A+
20b A+
21a,21b,21d A+
22b A+
23a,23b A+
23a-tev
24a K+
25b K+
26b K+
27b K+
28a,28b,28c K+
28a-sumo
28a-p53
29a K+
30a ,30c K+
31b A+
32a A+
32a pelB A+
35b K+
39b K+
40b K+
41a,41b k+
42a,42b K+
43b A+
43.1a A+
44a A+
48b K+
49b K+
50b K+
pETduet-1
pACYCduet-1
pCDFduet-1
pRSFduet-1
pColAduet-1
pET His
pET DsbA
pET GST
pET Trx
pQE载体
PQE2
pQE9
pQE30,31,32,
pQE30UA
pQE30LacIq
pQE40L
pQE60
pQE70
pQE80L
其他原核表达载体
PBBR1 MCS Cm+
PBBR1 MCS-2 K+
PBBR1 MCS-3 Tet+
PBBR1 MCS-4 A+
PBBR1 MCS-5 庆大霉素
pMal c2x,p2x,5x,5E
pBV220,221,222
pTrc99a,pTrcCKS,pTrcHis A,B,C
pBAD24,33,43,pBADHis A,B,C,pBADmycHisA
pEZZ18
pThio HisA A+
pGEX4T-1,4T-2,4T-3,5X-1,6p-1,2t,3x
pColdI
pColdII
pColdIII
pColdTF
pTwin1
pRsetA,B,C
PLLP-STQ
pINⅢ-ompA
pkk223-3
pSE380
pJLA502
pMBP-C,pMBP-p
pTYB11,pCYB1
Origene-N-His GST A+
pPin point CAT A+
pPin point xa1 A+
pPin point xa2 A+
pPin point xa3 A+
pCW ori
、
常见克隆载体
puc18,puc19,puc118,puc119
pBlue Script SK+,
pBlue ScriptⅡSK+
pEGM-3ZF(+) A+
pEGM-11ZF(+) A+
pACYC184
pBR322
基因敲除
pKD3,pKD4,pKD46,pcp20
pK18mobSacB
海肾荧光素酶报告基因
pGL3basic,promotor,enhancer,control
pGL3 CM
pGL4.29,4.30
毕赤酵母表达载体
pPIC9
pPIC9k
pPIC9k-1
pPIC9k-His
pPIC3.5
pPIC3.5k
pAO815
pHIL-S1
pPICZalphaA,B,C
pPICZalpha D
pPICZalpha E
pPICZalpha GA,GB
pPICZalpha FC
pPICZA,B
pGAPZalphaA,B,C
pMETalphaA,B,C
pFLD-cat A+
pFLD-cat Z+
pFLD1 Z+
毕赤酵母宿主菌
JC220
JC308
GS200
GS190
GS115
KM71
KM71H
Y1991
SMD1168
SMD1168H
X33
酿酒酵母表达载体
pYES2,pYES2-flag
pYES2NTA,NTB,NTC
pYES3CT
pYIP5,pYRP7,pADH2
pRSH41,pDC315,pDF15,pUG6
pESC-His,BFD14,BFD15,pDNR1,p334,pDR195
pRS316,pRS316HA
YEplac112,YCplac33,YCplac22-EGFP,
YEplac195,YEpLac181,YIP211
pYX212,pYX212-VHB
酿酒酵母宿主菌
INSV-
YPH499
YM4271
BY4741
W303-1A
真核哺乳动物荧光载体
pEGFP N1,N2,N3
Origene GFP
pLEGFP N1
pEGFP C1,C3
AIF-EGFP N1
pECFP N1,C1
pEYFP N1,C1
pEYFP-golgi
pEYFPmem
pBFPN1
FIV-BFP
pDsred MonomerN1
pDsRed1 mito
pDsRed2 mito
pDsRed N1,C1
pDsRed2 N1,C1
pDsRed2-ER
mRFP
真核哺乳动物载体
pIRES
pIRES2-EGFP
pADeasy-1
pADeasy-1(Bj5183)
pAdtrack
pAdtrack CMV
pShuttle
pShuttle CMV
pRL CMV
pCMV-HA
pVAX1
pVAST
pCI
pCI neo+
pCMV-myc
pflag-CMV2
pcDNA3.1 +
pcDNA3.1 zeo+
pcDNA3.1 neo+
pcDNA3.1 MycHisA
pcDNA3.1 MycHisB
pcDNA3.1-HBV genome
pcDNA3-mRFP
Hsp70-pcDNA3.1
pcDNA 4 Max B
psuper GFP neo
psuper Retro GFP neo
pSilencer4.1CMV puro+
pSilencer4.1CM neo+
psuper GFP neo
psuper retro GFP neo
pdisplay
pBud CE4.1
ptet on, ptet off
pRL-tk,pRL-CMV
植物表达载体
pcambia1301,1302,1303,1304,1305.2
2300,2301
3300
pcambia1301(EHA105)
pcambia1381Z,1391Z
PBI121,221
PBI221-GFP
植物农杆菌宿主
EHA105,LBA4404
植物RNAi载体
PHANNIBAL,PKANNIBAL
启动子检测
pEGFP-1
pkk232-8
分子伴侣:
PGKJE8,PGro7,pTf16,pKJE7,pGTf2
酵母双杂交
pGADT7,pGBKT7,pGADT7-T,pGBKlam,pGBK-53,pCL1
AH109,Y187
酵母单杂交
pGAD53m,p53-blue,p53-His,pLacZ,pHis,pHisi-1,
哺乳动物双杂交
pBIND-GFP,pBIND-ID,pGAD424,pGBT9,pG5lac,
大肠杆菌宿主菌
JM101,105,109,110
HB101,K802,C600,TH1,AM1,W3110,DH10bac
Y1089,Y1090,BL21,BL21(DE3),MG1655
BL21(DE3)plysS,BL21AI,BL21SI,BL21codon plus RIPL,BL21 trxB (DE3),BL21 star
DH5α,DH5αλpir,JM109,JM109(DE3),Top10,Top10F,,K12,DB3.1,XL1-blue,XL-10gold,BM25.8,SG1117,Turbo,TG1,TB1,C41(DE3),C43(DE3),Turner(DE3),M15,E2566,C2566,ER2529,JF1125,Bj5183,Stbl3,Stbl4
HMS174(DE3), HMS174(DE3)plysS, AD494(DE3)
Novablue(DE3),Rosettalblue(DE3)
Rosetta(DE3),Rosetta(DE5),Rosetta(DE3)plysS,
Orgami(DE3),OrgamiB(DE3),Orgami(DE3)plysS
Rosetta-gami2(DE3)plysS,Rosetta-gami(DE3),
Rosetta-gamiB(DE3),Rosetta-gamiB(DE3)plysS, Rosetta-gami(DE3)placI
枯草表达系统pMA5,pHCMC05,pGFP22,pGFP315,pHP13,pHP13-43,pHY-43,pWB980,pAOX1
枯草宿主菌:BS168,DB403,BCL,1A75,WB600,WB800N
昆虫表达系统:pfastBacI,pfastII,pfastIII,pfastBacHTA,pfastBacHTB,pfastBacHTC,pfastBacdual
巨大芽孢杆菌系统:pHis1525
巨大宿主菌:YYBM1,WH320
乳酸球菌表达系统 pMG36e,NZ9000,MG1363
乳酸酵母表达系统 pKLAC1,GG799
白色念珠菌系统pCR4,pCR4-GFP,p5921
酿酒酵母表面展示系统:pYD1,EBY100
标准微生物菌株
ATCC27853 铜绿假单胞菌
ATCC29212 粪链球菌
ATCC29213 金黄色葡萄球菌
ATCC35218 大肠杆菌
ATCC 35098四联球菌
NRRL Y-12968热带假丝酵母
NRRL Y-2021德巴利酵母
NRRL Y-1603毕赤氏巴斯德酵母
DSM3586野油菜黄
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文献和实验的步骤。当发生共抑制现象时,借由整合反向重复序列(复合整合模式)而产生 RNA 沉默的转基因植物,也能以通读方式从一个 T-DNA 拷贝转录到另一个 T- DNA 拷贝而产生 dsRNA。或者,与靶标 RNA 同源的反向重复序列转录所产生的外源基因,通过分子内的碱基配对产生 dsRNA,这比只用正义或反义 RNA 的基因沉默效果更好。目前,这一类产生自我互补转录产物的重组载体被广泛用于植物功能基因组研究[12 , 19 , 20]。RNAi 往往能稳定遗传,因此可以在后代中对其进行研究[21
发生同源重组,将重组载体中的DNA 序列整合到内源基因组中,从而得以表达。一般地,显微注射命中率较高,但技术难度较大,电穿孔命中率比显微注射低,但便于使用。[4,5]④.选择筛选已击中的细胞:由于基因转移的同源重组自然发生率极低,动物的重组概率为10-2 ~10-5 ,植物的概率为10-4 ~10-5 。因此如何从众多细胞中筛出真正发生了同源重组的胚胎干细胞非常重要。目前常用的方法是正负筛选法(PNS法),标记基因的特异位点表达法以及PCR 法。其中应用最多的是PNS法。[6]⑤.表型研究:通过观察嵌
et83214 我做水稻基因后期功能验证的时候,需要构建基因沉默载体,然后转基因至正常植株中,看有没有目标表型 现在我照着用得比较多的,自己重组改造了pNW55得到artificial miRNA,然后装到过表达的载体中,然后转基因。 不过因为实验室还没有这方面的成功先例,怕不保险,所以也想做一下siRNA,网上有很多在线设计,通过Blast验证以后,基本确定了几个RNAi的目标。 想问一下这方面的专家
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