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- 英文名:
PCR Core Kit
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需确认
- 供应商:
嵘崴达
- CAS号:
见产品外包装
- 保存条件:
−20°C
- 规格:
100 REACTIONS
PCR Core试剂盒
sufficient for ≤100 reactions, kit of 1 (5 components), suitable for PCR
别名:
PCR
一般描述
PCR核心试剂盒为特定模板的常规PCR进行最高灵敏度和特异性优化提供了所需的全部试剂(聚合酶、缓冲液、dNTP等)。为方便起见,试剂盒中的每种试剂成分都是以单独的小瓶形式提供的。这使得用户能够轻松更改反应混合物中聚合酶、dNTP和MgCl2的量。最重要的是,该试剂盒可轻松优化Mg2+的浓度,而这是PCR中最关键的变量之一。
应用
原理
PCR是一种在体外对特定DNA序列进行酶法合成的方法。反应使用可杂交至互补链上待扩增DNA序列两侧的两条寡核苷酸引物。一系列涉及模板变性、引物退火以及DNA聚合酶介导的退火引物延伸的重复循环可造成特异性DNA片段的积累,而相应DNA片段的两端是由引物的5′-端所定义的。
由于在某个循环中合成的引物延伸产物可在下一个循环中用作模板,因此每个循环中目标DNA的拷贝数大约会增加一倍;因此,PCR的20个循环可产生约一百万个目标DNA的拷贝(220)。引物的延伸是由Taq DNA聚合酶所催化的,而Taq DNA聚合酶是一种从嗜热真细菌嗜热栖热菌BM分离的热稳定DNA聚合酶。
PCR核心试剂盒设计用于为基于Taq DNA聚合酶的所有基本PCR应用确定单独的PCR条件。可通过使用试剂盒附带的不含Mg的缓冲液对反应缓冲液中非标准的Mg浓度进行优化,以获得具有更好灵敏度和特异性的检测体系。
包装
1个试剂盒包含5个组分。
| 11578553001 | PCR Core Kit | 1 kit (for 100 reactions of 50 µl final reaction volume) |
| 10105546001 | GOT, 2 mg | 2 mg (1 ml) |
| 10127876001 | L-LDH, (rabbit muscle), 25 mg L-乳酸脱氢酶 | 25 mg (5 ml) |
| 10165875001 | G6P-DH, Leuc. mesenteroides, 1 | 1,000 U (1 ml) |
| 11273990001 | QUICK SPIN G-25 RNA (100621) 2 | 20 columns |
| 11274015001 | QUICK SPIN G-50 RNA(100411) 20 | 20 columns |
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文献和实验and then probing the library for the correct DNA can be extraordinarily tedious. I have applied a simple “core sampling”procedure - involving “coring” an agarose sample out of a gel, and using it as template for another round of PCR - to get around this problem
core samples as substrate in PCR reactions: I make up 40ul/reaction of reaction mix, and allow 10ul per core. Simply add core to mix, vortex a little, spin down, cover with mineral oil. PCR according to taste (not inhibited by presence of a little
the plasmid sequences from the transgenic DNA. Run the DNA on an agarose gel and elute the band containing the transgenic DNA to be injected. Most elution methods work fine. We have used GeneClean from Bio101. The QiaEx gel extraction kit from Qiagen
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