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- 保质期:
1年以上
- 英文名:
DiR iodide [1,1‘-dioctadecyl-3,3,3’,3‘-tetramethylindotricarbocyanine iodide]
- 库存:
大量
- 供应商:
Solarbio
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10 mg
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文献和实验实验目的: 通过 DIR 染料标记外泌体,通过尾静脉注射 DIR-labeled Exosome,24 小时内观察外泌体在体内的代谢情况。 实验材料: DIR- Exosome,裸鼠; DIR-Exosome:染料终浓度 1uM,外泌体 200ug,体积 200ul; Exosome 来自 HEK293 无血清培养基(Umibio,UR51102)条件下获得,通过外泌体提取试剂盒提取(Umibio,UR52121)。 实验内容: 1、通过尾静脉注射 200 ug/支的 DIR- Exosome
碘化物缓冲液: 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM EDTA, 4 M NaCl。室温避光贮存。不知道这里面哪个是需要避光的?我怎么没有提出DNA来,不知道是为什么?用的是NEB手册上写的方法。1. 按上述方法进行噬菌斑扩增,在第一步离心后,将500 µl含噬菌体上清转入一新鲜离心管。2. 加200 µl PEG/NaCl,颠倒混匀,室温放置10 min。3. 离心10 min,弃上清液。4. 短暂离心,小心吸去残余上清。5. 沉淀物彻底重悬于100 µl碘化物缓冲液中
体,所有外泌体提取纯化方式都适用。 c、去除游离染料的方法推荐选择 3~10KD 的超滤管,利用其置换溶剂功能去除游离染料。具体步骤和实验参数请咨询超滤管厂商。 d、DiR 碘化物(DiR 染料)的发射波长肉眼不可见,需要使用配备 CCD 镜头或其他设备的近红外检测仪器,建议使用活体成像仪。 e、建议染料标记的外泌体注在射后 24h 内设置梯度时间进行观测,多数情况注射后 2-8小时荧光强度达到峰值。为保证观察结果,小动物需要做剃毛处理。 f、基于以下两个原因,建议准备 2 倍于正常活体成像和示踪
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