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货号:25200056
品牌:invitrogen
规格:100ML- PLASTIC- E-Z HOLD
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文献和实验不要太懒哦 请教各位高手,如果在细胞的消化传代过程中,我想以EDTA替代胰酶对细胞进行消化的话,EDTA的配方???浓度??多谢!! 佳杰宝贝 EDTA可以代替胰酶吗? 黑糊糊2000 EDTA 不能代替trypsin,EDTA是螯合剂结合钙离子的,钙离子可以抑制胰酶的作用,所以采用胰酶和EDTA一起来作用,当然EDTA 因为对螯合细胞结构之间的钙离子的作用,所以对细胞有一定程度的离散作用
问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
3), 10% 胎牛血清。传代:吸去培养液。 用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA 洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。加 2 - 3 毫升 Trypsin-EDTA,放在 37℃ 培养箱内约 5 分钟,直到细胞全部脱落。加 6 - 8 毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以 1:4 到 1:8 为宜,传代期间培养液更换 1 - 2 次)冻存:95% 培养液 + 5% DMSO 冻存于液氮。2. 293 细胞293 细胞比较容易转染
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