25cm²细胞培养瓶,透气盖,TC处理,灭菌，替代康宁【43

重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作

-DNA液，加入6ml DMEM完全培养基，37℃孵育过夜，再换液。 7  培养过程中观察细胞生长情况。约2周后可观察到细胞病变（CPE）出现（如用pAdTrack-CMV质粒，由于含GFP，可观察到绿色荧光）。 四 重组病毒鉴定 1  转导10-14d后，收集细胞沉淀，加入2ml灭菌的PBS混悬，冻融细胞，离心后收集上清保存于-80℃。 2  取30-50% 步骤1中上清，感染50-70%饱和度的25cm2 方瓶中293细胞。2-3d后出现明显细胞

各种用途的细胞培养瓶特性

改性处理后，可以让细胞更好的进行贴壁培养，这样根据细胞贴壁面积又可以分为25～175cm2多种。 国产的 细胞培养 瓶一般盖子都是封闭的，不带内垫，常用于密闭培养，可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多：密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的，聚酯盖常用于开放培养，只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。透气盖是在瓶盖中加了0.2μm疏水滤膜，提供无菌气体交换，减少污染的风险。常用于开放培养，推荐用于CO2

体外微核试验原理及注意事项

重悬后接种于细胞培养瓶，于 37℃ 二氧化碳培养箱中培养，后期细胞传代比例为 1:3。2、细胞准备将处于对数生长期，贴壁生长良好的细胞用胰蛋白酶（Trypsin-EDTA）消化处理制成细胞悬液，5 mL/瓶接种于 25 cm2 细胞培养瓶中，于 37℃、5% 二氧化碳培养箱中加湿培养约 24 h- 48 h。3、染毒处理吸去培养瓶中培养液，加入一定浓度的受试物、S9 混合液（不加 S9 混合液时，需用培养液补足）以及一定量不含血清的培养液，于培养箱中处理 3 h。弃去处理液，使用 PBS 洗涤