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- Solarbio
- 北京
- X1020-10
- 2025年07月14日
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Trypsin
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solarbio
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10ml
货号：X1020
规格：10ml
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产品介绍：
抗原修复用于甲醛固定的石蜡包埋组织切片。石蜡切片标本用甲醛固定，使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行免疫组化染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。 酶消化方法是常用的抗原修复方法之一，常用 0.1%胰蛋白酶和 0.4%胃蛋白酶液。一般说来，胰蛋白酶消化能力较胃蛋白酶弱，主要用于细胞内抗原的消化，胃蛋白酶主要用于细胞间抗原的消化。工作中要认真参照抗体说明书指示进行消化酶的选择，这样针对性更强，标记效果更理想。
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文献和实验1. 吸除培养瓶内旧培养液。 2. 向瓶内加入胰蛋白酶和 EDTA 混合液少许，以能覆满瓶底为限。 3. 置温箱中 2~5 分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。 4. 吸除消化液，向瓶内注入 Hanks 液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加 Hanks 液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用 Hanks 液冲洗，直接加入
比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。 5、 消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。 6、 分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/min)离心消化液5分钟，吸出上清，加入
培养法 1、 吸除培养瓶内旧培养液。 2、向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。 3、置温箱中2~5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。 4、吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。 5、用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞
