81孔塑料冻存盒（适用于1.8-2ml冻存管）

细胞冻存——“冬眠”指南

%。 经济适用版（推荐皮实型细胞） “10% DMSO +40%完全培养基+50% FBS”组合，性价比高，但保存效果略差于经典血清加DMSO组合。 进阶版 商业化无血清冻存液：尤其适用于无血清体系培养的细胞。 冻存密度 冻太少了：复苏后稀稀拉拉，养半个月才能传代。 冻太多了：冻存液不够用，细胞互相压死，DMSO毒性叠加。 冻存需有度，拿捏请看下表 索莱宝冻存建议 容器 1.8-2mL冻存管 推荐冻存体积

患者来源类器官的通用实验操作流程参考！

时间越长，BME溶解越充分。 ③4℃、200g离心5分钟收集类器官。 ④小心吸去上清，不要扰动沉淀。 ⑤（可选）若一个类器官培养物使用了多个15ml锥形管收集，将每个试管的沉淀重悬于1mladDMEM/F12+++培养基中，全部转移至一个15ml锥形管中。再次4℃、200g离心5分钟，小心吸去上清，不要扰动沉淀。 ⑥加入所需体积的无细胞冻存培养基，用P1000移液器上下吹打充分重悬类器官。 关键提示：每4个24孔细胞培养板的“原始”孔类器官使用500μl冻存培养基。   ⑦每个无菌冻存管加入500μ

养细胞就跟养娃一样，过来人告诉你几点经验

方面对某些细胞（如 HBE4-E6/E7 肺上皮细胞）的毒性也过大。对于这些细胞，则应使用甘油。甘油可以通过高压蒸汽灭菌，而 DMSO 只能通过过滤除菌。DMSO 或者甘油至少应达到试剂级（或者更高级别，如细胞培养级），并且分装，避光保存。 3 细胞冻存的速率有很多方法可以实现 1℃/min 的降温速度。电脑控制的可编程电子降温系统是最好的方式，可以精确保持降温速度。这也是 ATCC 唯一采用的方法。但这种设备价格较高。比较经济的方式是将冻存管放置于冻存盒中，在低于 –70℃ 的冰箱中冻存 24 小时。已有